Инфаркт у кроликов

Сердца кроликов с экспериментальным инфарктом миокарда, находившиеся в 10-дневном хроническом опыте и обследованные ранее электрокардиографически, подверглись патоморфологическому исследованию.

Исследования проведены на 24 кроликах, 8 из которых служили контролем и гликозидов не получали. Две другие-группы животных (по 8 в каждой) получали ежедневно гликозиды: строфантин К или эризимин.

К концу 10-х суток после перевязки венечных сосудов кроликов забивали. Сердца их после соответствующей обработки заливали в целлоидин и затем изучали патоморфологически. Для удобства гистологического исследования каждое сердце делили поперечными разрезами на 4 приблизительно равные части (блока). Каждый блок изучали на 6—8 поперечных гистологических срезах. Применяли окраску гематоксилин-эозином и по вам Гизону.

При оценке характера действия изучаемых гликозидов мы учитывали главным образом степень зрелости соединительной ткани в рубцующихся инфарктах, а также наличие нерассосавшихся некротизированных мышечных волокон, воспалительных реакций и кровоизлияний.

Через 10 дней после перевязки нисходящей ветви левой венечной артерии у всех кроликов имелись инфаркты миокарда, находящиеся в различных стадиях организации. Рубцующиеся инфаркты располагались главным образом на уровне и несколько ниже лигатуры, захватывая переднюю стенку левого и отчасти правого желудочков и распространяясь на переднюю треть межжелудочковой перегородки. В выше, и нижележащих отделах сердца также обнаруживались соединительнотканные разрастания, занимающие, однако, меньшую площадь.

В ряде случаев мышечная ткань была замещена рубцовыми полями сплошь от эпикарда до эндокарда, включая переднюю папиллярную мышцу. В отдельных случаях, наоборот, заместительный склероз был выражен слабо и отмечался лишь субэпикардиально вблизи лигатуры. При этом наблюдалось некоторое усиление соединительнотканной стромы миокарда в близлежащих участках сердца.

У 5 кроликов контрольной группы рубцующиеся инфаркты состояли преимущественно из молодой рыхлой соединительной ткани, богатой новообразованными сосудами и клеточными элементами. Явления «коллагенизации были выражены.

Рис. 6. У контрольного кролика на 10-й день после перевязки венечной артерии на фоне рыхлой соединительной ткани виден большой участок нерассосавшегося некроза, окруженный круглоклеточным инфильтратом.

Рис. 7. Рубцовые изменения в миокарде у кролика, получавшего строфантин Ю, на 10-й день после перевязки венечной артерии.

слабо. Отдельные пучки волокнистых структур, слабо окрашивающихся фуксином, разделены обширными пролифератами молодых соединительнотканных клеток. У 3 контрольных кроликов в миокарде на фоне молодой соединительной ткани наряду с отдельными участками фиброза имели место нерассосавшиеся некротизированные мышечные волокна. В одном из этих случаев (рис. 6) участок некроза был очень большим — он занимал весь средний слой передней стенки левого желудочка. Зона некроза была окружена круглоклеточным инфильтрационным валом.

У кроликов, получавших гликозиды, в миокарде также имели место организующиеся инфаркты. Однако соединительная ткань, развивающаяся на месте некроза, отличалась в этих случаях большей степенью зрелости. Рубцовые поля состояли преимущественно из участков плотного фиброза, содержащего большое количество коллагеновых волокон, ярко окрашивающихся фуксином, с умеренным количеством гистиоцитарных элементов (рис. 7, в), В случаях обширных инфарктов рыхлая соединительная ткань сохранялась к моменту исследования лишь в глубоких слоях миокарда — в трабекулярных мышцах и субэндокардиально.

Рис. 8. Грубый соединительнотканный рубец в миокарде у кролика, получавшего эризимин, на 10-й день после перевязки венечной артерии.

После лечения строфантином плотный соединительнотканный рубец на месте инфаркта имел место в 4 из 8 случаев. В 2 случаях инфаркты занимали небольшую площадь и состояли из небольших плотных рубчиков, расположенных субэпикардиально на уровне лигатуры. В одном случае при наличии обширной зоны инфаркта в центральной его части имелись участки переживающих мышечных волокон. Соединительная ткань, окружающая их, содержала большое количество молодых клеточных форм. У одного кролика в рубцующемся инфаркте имелись небольшие участки нерассосавшихся некротизированных мышц. У него же в миокарде отмечались множественные кровоизлияния из мелких и средних сосудов. Множественные мелкие кровоизлияния в миокард были отмечены также у 2 других кроликов, леченных строфантином К.

После лечения эризимином плотный фиброзный рубец имелся у 4 из 8 кроликов. В одном случае на фоне соединительнотканных разрастаний наряду с участками плотного фиброза встречались отдельные мышечные волокна, находящиеся в состоянии некробиоза. Наличие нерассосавшегося некроза в рубцующемся инфаркте отмечено также только в одном случае. У 2 кроликов инфаркты были очень небольшими — на уровне лигатуры — и полностью зарубцевавшиеся. У кроликов, получавших эризимин, кровоизлияний в миокард отмечено не было. *
Выводы
1. Строфантин К и эризимин оказывают положительное влияние на ритм сердца при остром нарушении венечного кровообращения. Эти гликозиды умеренно увеличивают амплитуду сердечных сокращений, уменьшенную после перевязки нисходящей ветви левой венечной артерии.

2. При введении строфантина К и эризимина животным в остром периоде нарушения венечного кровообращения повышается вольтаж зубцов электрокардиограммы и нередко снижается до изоэлектрической линии интервал R(S)—Т. Строфантин К и эризимин заметно снижают систолический показатель, повышенный после перевязки венечной артерии. Стабилизация электрокардиографических изменений у кроликов с экспериментальным инфарктом миокарда при лечении сердечными гликозидами наступает раньше, чем у контрольных животных.

3. Существенных различий в действии строфантина К и эризимина на сердце при экспериментальном нарушении венечного кровообращения не отмечено.

4. При нарушении коронарного кровообращения у кроликов наблюдается увеличение поглощения кислорода тканью миокарда. Строфантин К и эризимин увеличивают коэффициент поглощения сердечной мышцей в условиях острого нарушения венечного кровообращения. Эризимин вызывает более резкое увеличение QO2, чем строфантин. После перевязки нисходящей ветви левой венечной артерии поглощение кислорода тканью задней стенки сердца усиливается под действием сердечных гликозидов более резко, чем тканью передней стенки.

5. У кроликов, получавших строфантин К и эризимин, рубцевание инфарктов миокарда происходило примерно одинаково и несколько раньше, чем у контрольных животных.

6. В условиях экспериментального инфаркта миокарда эризимин имеет преимущества перед строфантином К: после лечения строфантином К в миокарде имелись кровоизлияния, а после лечения эризимином кровоизлияний не отмечалось.

ЛИТЕРАТУРА
Виноградов С. А. и Кянджунцева Э. А. Труды I Московского медицинского института имени И. М. Сеченова. Т. 1, М. 1956.

Виноградов С. А. Экспериментальный инфаркт миокарда и влияние некоторых состояний организма на его развитие. Автореф. дисс. докт. Симферополь, 1957.

Визир А. Д. Лечение хронической сердечно-сосудистой недостаточности эризимином. Врачебное дело, 1958, № 12, стр. 1271 —1274.

Воронова А. М., Галибина А. И. Лечение больных сердечно-сосудистой недостаточностью внутривенным вливанием эризимина. Советская медицина, 1955, № 1, стр. 45—56.

Закусов В. В., Каверина Н. В. Некоторые аспекты проблемы фармакологии коронарного кровообращения. В кн.: Новые данные по фармакологии коронарного кровообращения. М., 196Э, стр. 7—26.

Нейман И. М. Руководство по патофизиологии. Под ред. А. А. Богомольца, т. 2, ч. 2. М. 1947.

Смирнов В. Н. Вопросы лечения инфаркта миокарда, Казань, 1957.

Шолохова Г. И. Лечение эризимином больных с сердечной недостаточностью. Клиническая медицина, 1957, № 5, 56—61.

Черкес А. И. Мельникова В. Ф. Дмитриева Н. М и Рубчинская К. И. Аннотации научных работ АМН СССР, 1934 г.

Lamprpeht W., Lamprecht G. Носkегt Т., Норрe-Sеуlегs Z. Fhyssol. Chem., 1957, 307, N. 2—6, 144—153. WoIleim E. Dtsch med. Wschr., 1956, 51. 2080—2088.

Zimmermann O., W u stinger E., Hofbauer K. Wien. klin. Wschr., 1954, 50, 951—953.

* Автор приносит глубокую благодарность доценту кафедры патологической анатомии I МОЛМИ Г. А. Князевой за оказанную консультативную помощь при анализе материалов данного исследования.

Владимир В. Давыденко 1 , Андрей А. Матюков 1 , Тимур Д. Власов 1 , Наталия В. Цупкина 2 , Анатолий Н. Ялфимов 3 , Георгий П. Пинаев 2 , Халида К. Аминева 1

1 Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский Университет им. И.П.Павлова

2 Институт цитологии Российской Академии наук, Санкт-Петербург

3 Российский центр радиологии и хирургических технологий, Санкт-Петербург

Резюме

Резюме

Введение. На протяжении последних 10 лет изучались различные варианты клеточной терапии, направленной на улучшение результатов лечения инфаркта миокарда (ИМ), включая кардиомиопластику. Аутологичный костный мозг широко применяется в качестве источника изолированных препаратов клеток, в т.ч. свежеполученные мононуклеарные клетки (МНК) и культивированные мультипотентные мезенхимные стволовые клетки (ММСК). Целью нашего пилотного исследования было сравнение кратко- и долгосрочных эффектов интрамиокардиального введения МНК и ММСК на клиническое течение и исходы экспериментального ИМ. Материалы и методы. Эксперименты проводили на кроликах Шиншилла весом 2.8 + 0.2 кг. ИМ моделировали путем лигирования передней нисходящей левой коронарной артерии. Фракцию МНК получали из аспирата костного мозга. Культуру ММСК выращивали путем пассажей МНК в среде Игла с 10% фетальной телячьей сыворотки. Инъекции суспензий МНК и ММСК осуществляли в 6 точек области инфаркта. Выжившие животные были разделены на 4 группы (по 13 в каждой): группа 1 (контроль); группа 2 (плацебо); группа 3 (введение ММСК), и группа 4 (введение МНК). ЭКГ и эхо-КГ проводились всем животным од хирургического вмешательства, а также через 1 мес. и 1 год после него. Показатели перфузии миокарда оценивали с помощью технологии SPECT. Размеры зоны ИМ (зоны перфузии) определяли посредством окрашивания срезов сердечной ткани с помощью 2,3,5-ТТС. Также проводили рутинные гистологические исследования срезов миокарда. Степень васкуляризации различных областей миокарда оценивали морфологическими методами.

Внутрисердечная пересадка аутологичных клеток костного мозга (МНК и ММСК) в области экспериментального ИМ у кроликов в его острой фазе приводила к модификации его естественного развития и вызывала принципиально различные морфофункциональные исходы. Через 10 дней после коронарной окклюзии у всех животных отмечалось резкое снижение перфузии передней стенки левого желудочка мио­карда. (p

Повышение качества жизни, (в частности, сохранения и укрепления здоровья) в условиях современного времени, приобретет особенности современного общества (природно-экологических, социально- экономических, научно-технических) большую актуальность. Одним из приоритетов государственной политики Российской Федерации является: «сохранение и укрепление здоровья населения на основе формирования здорового образа жизни и повышения доступности и качества медицинской помощи, профилактики факторов риска развития неинфекционных заболеваний и реабилитационных услуг, эффективность и безопасность которых (при конкретных заболеваниях или патологических состояниях) подтверждена принципами доказательной медицины» (Концепции развития системы здравоохранения в Российской Федерации до 2020 г.).

Фармакотерапия образа жизни на современном уровне развития общества выступает как важный способ сохранения постоянства внутренней среды организма и увеличение адаптации к внешней среде (в том числе после перелетов, смены часовых поясов, физических нагрузок или реабилитации, т. д.) и заболеваний.

На наш взгляд для поиска перспективных лекарственных средств необходимо обратится к богатому опыту традиционной и народной медицине, что совместно с применением фундаментальных законов и принципов поможет ввести в медицинскую практику новые лекарственные средства [1]. Значительный интерес представляет семейство толстянковых (Crassulaceae), многие растения которого применяются в традиционных медицинских системах стран Азии, Тибета, Монголии, Китая, Алтая [6]. Достаточно широко данные растения представлены в Байкальской Сибири. Среди данных представителей есть перспективные растения, для получения высокоактивных препаратов адаптогенного и биостимулирующего действия. Используя принцип филогенетического родства для поиска перспективных лекарственных растений, был начат анализ и изучение близкого родственника Родиолы розовой (золотой корень) (Rhodiola rosea) по семейству толстянковые (Crassulaceaе) – Горноколосника колючего (Orostachys spinoza) [2]. Анализируя, полученные результаты, ряда экспериментов на белых крысах, проведенных нами, для изучения биологической ценности тонизирующего и стимулирующего фармакологические свойства экстракта Горноколосника колючего, мы отметили его превосходство по некоторым показателям над представителями семейства Толстянковых (Crassulaceae), таких как Родиола розовая (Rhodiola rosea) являющихся признанными лекарственными растениями [3;4;5;7]. К примеру, в медицинской практике используется в качестве биостимулятора растения семейства толстянковые каланхоэ перистое (Kalanchoe pinnata (Lam.) Person.), которое также является представителем семейства толстянковых. Сок каланхоэ (Succus Kalanchoes) используется как наружное противовоспалительное средство, способствуют быстрому очищению ран от некротических тканей, ускоряет эпителизацию ран и язв. В стоматологической практике применение cока каланхоэ и его препаратов способствует ликвидации отёчности, застойных явлений и болей в деснах, усиливает заживление ран после вскрытия абсцесса. После ряда экспериментов на кроликах, по заживлению кожной линейной раны с применением экстракта из Горноколосника колючего, были получены следующие результаты: сравнительная оценка скорости заживления кожной линейной раны с применением различных лекарственных препаратов стимулирующих данный процесс показала, что наиболее выраженное влияние оказывает препарат Горноколосника колючего [8;9]. Нам представилось перспективным сравнить с группой контроля время образования и качество соединительной ткани рубца в очаге инфаркта миокарда в эксперименте с использованием модели инфаркта миокарда у кроликов с применением экстракта из Горноколосника колючего.

Цель исследования: Создать экспериментальную модель инфаркта миокарда у кроликов для сравнительного изучения лекарственных свойств препаратов на основе экстракта из Горноколосника колючего.

Материалы и методы. Для создания модели инфаркта миокарда были выбраны кролики, поскольку они имеют две изолированные плевральные полости, что облегчает выполнение доступа к сердцу. После эфирного наркоза доступ длиной 7-8 см осуществлялся, начиная от грудины по переднее боковой стороне в 4 межреберье с лева, далее вскрыли плевральную полость, создали максимальный обзор с помощью ранорасширителя.

Результаты: В эксперименте были выявлены топографо-анатомические несоответствие с моделеми представленных в литературе, так как окклюзированые сосуды оказались венами. В подтверждение этому, после лигирования сосуда поднялось гидростатическое давление на участке сосуда ниже лигатуры (от лигатуры к верхушке сердца) – сосуд был полон и упруг, выше лигатуры сосуд спался. Ниже лигатуры развивается умеренный отек тканей и местный цианоз. Эти наблюдения подтвердились данными изложенными в монографии: «Сравнительная анатомия и эволюция кровеносных сосудов» Кульчицкой К.И., Роменского О.И., 1985г.-176 с., где было отмечено: «Большинство ветвей венечных артерий у грызунов проходит под миокардом».

На макропрепаратах отмечается: утоншение миокарда (дистрофия части стенки левого желудочка в зане поражения) в зоне поражения.

На микропрепаратах подтвердилось интрамускулярное расположение артерий. Гистологическое исследование тканей сердца на десятые-одиннадцатые сутки окклюзии сосуда показало: определяются признаки организации зон некроза миокарда. Формируются элементы незрелой соединительной ткани: фибробласты, основное вещество, небольшое количество волокон коллагена. Регистрируются остатки лейкоцитарного вала с преобладанием мононуклеаров.

1) Выявлены особенности расположения коронарных сосудов сердца у кролика;

2) Необходимо модифицировать экспериментальную модель инфаркта миокарда на сердце у кроликов, что является с нашей точки зрения перспективным в плане изучения действия лекарственных растений на процесс зоны рубцевания инфаркта миокарда.

Список литературы

1. Гончарова С. Б. Очитковые (Sedoideae, Crassulaceae) флоры российского Дальнего Востока. – Владивосток: Дальнаука, 2006. – 223 с.

2. Гончарова С. Б., Артюкова Е. В., Гончаров А. А. Филогенетические связи представителей подсемейства Sedoideae (Crassulaceae) на основании сравнения последовательностей ITS региона ядерной рДНК // Генетика. – 2006. – Т. 42, № 6. – С. 1-8.

3. Левента А. И., Одинец А. Д., Охремчук Л. В., Усов Л. А. Влияние извлечений из горноколосника и рододендрона Адамса на поведенческие реакции лабораторных животных // Сибирский медицинский журнал. – 2010. – Т. 95, №

4. – С. 103-105. 217 4. Левента А. И., Одинец А. Д., Усов Л. А. Анксиолитические и мнемотропные эффекты извлечений из горноколосника и рододендрона Адамса в эксперименте на лабораторных животных // Сибирский медицинский журнал. – 2010. – Т. 96, № 5. – С. 125-128.

5. Левента А. И., Одинец А. Д., Шапкин Ю. Г., Щукин Д. А.. Влияние извлечений из горноколосника и рододендрона Адамса на адаптационные поведенческие реакции лабораторных животных в условиях эксперимента // Материалы межрегиональной научно- практической конференции, посвященной 80-летию медико-профилактического факультета ИГМУ. – Иркутск, 2010. – С. 279-283.

6. Левента А. И., Одинец А. Д., Усов Л. А., Шабатурова О. В. Сведения о применении перспективного растения горноколосник колючий в народной медицине Восточной Сибири и традиционных медицинских системах стран // Материалы межрегиональной научно-практической конференции, посвященной 80-летию медико-профилактического факультета ИГМУ. – Иркутск, 2010. – С. 283-287.

7. Левента А. И., Одинец А. Д., Щукин Д. А., Шапкин Ю. Г., Тимофеева С. А. Изменение адаптационных поведенческих реакций лабораторных животных в условиях эксперимента под влиянием извлечений горноколосника и рододендрона Адамса // Актуальные вопросы клинической фармакологии. Сб. научных трудов, посвященный 25-летию кафедры клинической фармакологии ИИУВа // под. ред. Н. В. Верлан. – Иркутск РИО ИГИУВа, 2011. – С. 30-31.

8. Левента А. И., Кузнецов С. М., Щукин Д. А. Применение экстракта горноколосника для стимуляции заживления кожной линейной раны // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН, 2011, № 4(80) стр. 64.

9. Семинский И. Ж., Левента А. И., Кисель С. Е., Щукин Д. А. Морфологические особенности заживления кожной линейной раны под действием препарата на основе экстракта горноколосника колючего // Сборник научных трудов Всероссийской конференции

10. Сравнительная анатомия и эволюция кровеносных сосудов / Кульчицкой К.И., Роменского О.И.// 1985 г. – 176 с.