Anti hcv антитела ифа

Существуют лабораторные маркеры вирусного гепатита С, которые помогают подтвердить или исключить наличие этого заболевания. Эти маркеры и обнаруживаются с помощью анализов крови на HCV.

Лабораторная диагностика гепатита С

В диагностике гепатита С используются различные методы исследования крови. Они дают возможность:

Пациенты, коинфицированные другими вирусами, обычно плохо реагируют на лечение. Ни одно исследование не сравнило эти три препарата с перспективой, рандомизацией и контролем. Точно так же превосходство любого типа комбинации над монотерапией никогда не было однозначно доказано.

У нелеченных пациентов виремия обычно остается на постоянном уровне. Быстрая элиминация вируса из крови приводит к тому, что период полувыведения в кровообращении оценивается всего от 3 до 7 часов. Пока не определено, вызывает ли вирус причинение травмы печени прямым или иммуно-опосредованным цитопатическим механизмом. Возможно, что оба механизма задействованы одновременно или в разное время. В нескольких исследованиях подтверждается наличие иммунного механизма в генезе хронического гепатита С, опосредованного специфическими клонами цитотоксических Т-лимфоцитов.

• подтвердить причастность вируса С к возникновению воспаления печени у пациента;
• установить форму заболевания (острая или хроническая);
• позволяют определить наличие и количество РНК-копий вируса в кровяном русле на момент обследования;
• получить информацию для прогноза по течению процесса;
• определить необходимость и эффективность противовирусной терапии, целесообразность ее продолжения.

HCV анализ крови – исследование крови, позволяющее обнаружить маркеры гепатита С. Данный анализ может назначить инфекционист или гепатолог в таких случаях:

Однако ложные или ложноотрицательные результаты могут возникать, если не соблюдаются строгие стандарты. Существующие методы количественной оценки разделены между теми, которые усиливают сигнал и усиливают сигнал не всегда рекомендует использовать тот же тест для каждого пациента, результаты могут отличаться из-за одного способа к другому. Однако в Бразилии и в западном мире преобладает генотип 1. . Переливание крови было основным источником инфекции более 10 лет, но редко участвует в более поздних случаях.

С другой стороны, употребление наркотиков неуклонно растет с годами. по всему миру. Основным фактором риска острого гепатита С является употребление инъекционных наркотиков, что составляет около 60% новых случаев в год. Сексуальный путь считается нечастым средством заражения.

• определение типа гепатита при острой форме;
• уточнение диагноза при хроническом гепатите;
• качественное и количественное обнаружение вируса С;
• планирование, проведение и окончание противовирусной терапии.

Вышеуказанные анализы крови могут назначать врачи и других специальностей с целью выявления сопутствующих заболеваний и степени поражения печени (например, перед плановым оперативным лечением).

К острым случаям относятся пациенты с гемодиализом, специалисты в области здравоохранения, лица с инфицированными родственниками. Алкоголизм и низкий социально-экономический статус считаются факторами риска. В большинстве исследований, связанных с контролем над случаями, не приписывается чрезмерный риск хирургическим процедурам, стоматологии. татуировка, иглоукалывание и пирсинг. Использование аспирина также не является существенным фактором передачи.

Острый гепатит С имеет клинические особенности, подобные тем, которые описаны для других форм вирусного гепатита. Около 30% острых случаев симптоматичны, но только 10% случаев присутствуют при желтухе. Фулминантный гепатит встречается крайне редко. Естественная история этой группы пациентов с постоянно нормальными аминотрансферазами еще недостаточно изучена, хотя цирроз, по-видимому, встречается нечасто.

Расшифровка анализа крови на HCV

Если HCV-антитела обнаружены в исследуемой крови пациента, это значит, что пациент болеет в настоящее время или перенес ранее вирусный гепатит С. Для более точной диагностики необходимо дополнительно провести исследование крови двумя методами: серологическим (ИФА) и исследование крови в полимеразной цепной реакции (ПЦР).

От 10 до 40% пациентов с острым гепатитом С представляют собой спонтанное разрешение процесса, однако разрешение в хронической фазе зависит от антивирусного лечения. Хронический гепатит С характеризуется медленным прогрессированием, часто бессимптомным.

Как проводится анализ на антитела к гепатиту С?

Наиболее характерным лабораторным обнаружением гепатита С является флуктуирующая картина аминотрансферазы в хронической фазе. Только у 10% острых случаев наблюдается значительное увеличение билирубина, при этом 90% острых инфекций являются анатерическими.

Если результат HCV анализа крови отрицательный – значит, вируса гепатита С не обнаружен в крови или прошло менее 2-4 недель с момента проникновения вируса в организм и антител еще нет. Это может означать также, что имеет место серонегативный гепатит С, когда антитела к вирусу не вырабатываются вообще. Такой вариант встречается в 5% случаев.

Щелочная фосфатаза является нормальной или не повышенной, поскольку гепатит С обычно не присутствует с холестазом. Гепатит С не проявляет равномерной эволюции. Генотип и вирусная нагрузка не влияют на прогрессирование заболевания. В настоящее время неопределенность в отношении клинического течения долгосрочного гепатита С из-за невозможности определить дату начала была болезнь в большинстве случаев необходимость гистологического наблюдения, чтобы продемонстрировать прогресс в хронической фазе, медленная эволюция гепатита острый для цирроза. и тот факт, что многие пациенты получают лечение во время болезни, что делает невозможным оценку естественного прогрессирования.

ИФА (anti-HCV анализ крови)

Когда вирус (антиген) проникает в организм, иммунная система, спустя 2 или 3 недели, начинает продуцировать специфические HCV-антитела. Серологический (или ИФА) анализ крови позволяет их обнаружить. Иногда выявление HCV-антител является неожиданностью для больного, так как гепатит С многие пациенты переносят на ногах, в легкой (безжелтушной) форме, «под маской» другого заболевания, например, ОРВИ.

Сравнивая фиброз, обнаруженный в печени во время гистологического диагноза с предполагаемой датой передачи от фактора риска, можно рассчитать среднюю годовую скорость развития фиброза. В третичных центрах имеются специализированные подразделения для расширенного ведения дел, включая трансплантацию печени. Кроме того, пациенты, получившие вирус после трансфузии, имели более высокий средний возраст и имели более высокий шанс сопутствующих заболеваний, которые могли бы ускорить течение заболевания.

Развитию этих продуктов мешает высокая скорость вирусных мутаций. Снижение риска заражения охватывает. Нет пользы в использовании иммуноглобулина после чрескожной аварии с зараженным материалом. Для стабильных моногамных лиц существующие данные недостаточны, чтобы рекомендовать обязательное использование презервативов.

Обнаруженные HCV-антитела не защищают организм от повторного заражения вирусом С и повторного развития инфекционного процесса.

Выявленные антитела могут быть 2 классов. Класс М антител (или иммуноглобулины класса М – anti-HCV IgМ) означает, что пациент на момент обследования имеет острую форму гепатита С (или хроническую форму в стадии обострения). Эти антитела начинают вырабатываться на 4-6 неделе с момента проникновения антигена в организм.

Тип доставки, похоже, не влияет на передачу, и ему разрешено кормить грудью. Этот критерий действителен только для пациентов с генотипом 1, получавших пегилированный интерферон и рибавирин. Предварительная обработка биопсии печени рекомендуется для постановки процесса и выявления других возможных причин заболевания печени, хотя недостаток биопсии не должен использоваться для противопоказания лечения. Пациенты с четким циррозом не требуют биопсии, а также людей с высоким риском кровотечения, таких как гемофилии.

Рибавирин следует использовать с осторожностью или противопоказанием у лиц со значительной анемией, ишемической болезнью сердца или при гемодиализе. Не используйте лекарства во время беременности. В настоящее время рекомендуемое стандартное лечение хронического гепатита С состоит из сочетания пегилированного интерферона и рибавирина, как самого последнего международного консенсуса.

Антитела класса G (anti-HCV Ig G) синтезируются на 11-12 неделе заболевания. Они могут свидетельствовать о перенесенном ранее гепатите С, так как эти антитела сохраняются в крови практически на всю жизнь. Титр их постепенно снижается и может спустя несколько лет достигнуть неопределяемого уровня.

Суммарные антитела или Anti-HCV total – (anti-HCV IgМ + anti-HCV Ig G) могут выявляться на 4-6 неделе острого процесса в печени или при хронической его форме. Суммарные антитела могут выявляться также у переболевших (в том числе самостоятельно, без лечения, выздоровевших).

Недавнее исследование показало, что продолжительность лечения должна составлять 24 недели для пациентов с генотипом 2 или 3 и 48 недель для пациентов с генотипом. Пациенты с генотипами 4, 5 или 6 также могут лечиться в течение 48 недель, но числа, включенные в рандомизированные контролируемые исследования, все еще малы и недостаточны для окончательных выводов.

Что представляют собой антитела к гепатиту С?

У пациентов с генотипом 2 или 3 вирусологический ответ следует оценивать только в конце лечения; у тех, у кого генотип 1, на 12 неделе лечения. Факторы прогноза для ответа на лечение. Основными детерминантами благоприятного ответа при хроническом гепатите С являются следующие.

Тест на обнаружение суммарных антител проводится лицам из группы риска (пациентам с хроническим гепатитом при неустановленной его этиологии, потребителям наркотических средств, реципиентам донорской крови и другим). Если суммарные антитела HCV обнаружены, то это не обязательно значит, что вирус остался в организме и продолжает поражать печеночные клетки. Для уточнения ситуации с вирусом необходимо еще провести исследование крови методом ПЦР.

По причинам, которые еще не известны, черные пациенты обычно представляют более низкий процент устойчивого вирусологического ответа. Поведение неответчиков и рецидивов. В нескольких недавних исследованиях были рассмотрены стратегии, позволяющие пациенту пройти лечение с помощью соответствующих доз лекарств, включая использование антидепрессантов, стимуляторов колоний эритропоэтина и гранулоцитов.

Существует три генотипа с различным географическим распределением. Фактически, степень некропровоспалительной активности печени коррелирует с интенсивностью окрашивания дельта-антигена, обнаруженного в ткани печени, иммуногистохимией. Хотя иммунологические явления также выявлены у пациентов с дельта-гепатитом, особенно при обнаружении аутоантител к микросомальной фракции печени и почек 3-го типа, их роль в генезе повреждения печени не считается важной.

Что это такое – ПЦР?

Истинным подтверждением наличия и размножения вируса в организме является выявление РНК вируса С при помощи качественного метода ПЦР. Исследование крови количественным методом ПЦР позволяет уточнить вирусную нагрузку (количество вирусных копий в 1 мл крови). Этот показатель весьма важен для решения вопроса о противовирусной терапии.

Нет доступных коммерчески доступных наборов, и выбор наиболее подходящих праймеров для амплификации генома становится затруднительным из-за большой гетерогенности дельта-агента. Парентеральный путь является основополагающим в его распространении, его загрязнении путем неадекватного перкутанного воздействия или он отвечает за внутрисемейную передачу. В недавнем исследовании, проведенном на острове Формоза, сексуальный контакт с проститутками был самым важным способом передачи вируса, с передачей жен.

Признаки, симптомы и лабораторные данные. Клинические и лабораторные проявления неотличимы от других вирусных гепатитов. Коинфекция обычно представляет собой двухфазный курс. с двумя пиками сыворотки аминотрансферазы с максимальным интервалом в 6 месяцев между ними, что отражает гепатоцеллюлярный ущерб, вызванный каждым вирусом последовательно.

Если обнаружено меньше 750 РНК-копий/мл – это свидетельствует о минимальной вирусной нагрузке. При значении показателя меньше 2х106 копий/мл – низкая вирусная нагрузка. Показатели выше 2х106 РНК-копий/мл означают высокую вирусемию.

Наиболее эффективной является противовирусная терапия при низкой вирусемии. Показатели вирусной нагрузки при гепатите С не отражают тяжести заболевания, для этого нужны дополнительные обследования, позволяющие выявить степень поражения печеночных клеток, нарушение функции печени, признаки цирротических изменений в печени. HCV в анализе крови такой информации дать не может.

Цена на исследование

Болезнь обычно самоограничивается, с возвратом аминотрансферазы к нормальным значениям в среднем периоде в 10 недель. Только 2% коинфекции происходит в хроническом состоянии. Однако печеночная дельта почти всегда характеризуется высокой смертностью в острой фазе и быстрой прогрессией цирроза в хронической фазе.

Может существовать связь между доброкачественной эволюцией и конкретным генотипом вируса. Ламивудин не влияет на этот вирус. Факторы прогноза ответа. Было высказано предположение, что более короткая продолжительность заболевания может быть предиктором хорошего ответа, но лечение детей с хроническим дельта-гепатитом вызывает разочарование.

Если anti-hcv total отрицательный, что это значит для человека? При инфицировании возбудителем гепатита С в организме человека происходит выработка антител для борьбы с этим вирусом, носящим название hcv. Эти антитела anti-hcv являются лабораторным маркером, то есть при обнаружении их крови диагностируют поражение печени гепатитом С. Симптоматика этого заболевания долгое время стертая, а выявляется патология чаще всего случайно, с помощью лабораторных исследований крови.

Наиболее часто используемый режим составляет от 9 до 10 миллионов единиц подкожно 3 раза в неделю более года. Поскольку некоторые пациенты предлагают более поздний ответ на лечение, рекомендуется, чтобы их считали не принимающими ответные меры после минимум одного года с интерферонами.

Белок из 123 аминокислот с неизвестной функцией, вероятно, ассоциированный с вирусным цитоскелетом. Было идентифицировано по меньшей мере четыре основных генотипа, сгруппированных в один серотип. Гепатоцит начинает вырабатывать вирионы. которые выделяются канальцевым полюсом наряду с желчной секрецией, из организма в кале в течение большей части инфекции. Количество вирусных частиц, выделенных в фекалиях инфицированных лиц, по-видимому, ниже, чем у гепатита А, что затрудняет вторичную инфекцию человека во время эпидемий.

Пути заражения и действие на печень гепатита С

Вирус, вызывающий это заболевание, использует для своей жизнедеятельности клетки печени, что приводит:

• к развитию воспалений в этом органе;
• цитолизу, при котором происходит разложение печеночных клеток;
• иммунные комплексы вызывают аутоиммунную агрессию к воспаленным клеткам органа;
• иммунные механизмы запускают синтез антитела к hcv.

Часто болезнь обнаруживается на стадии развития цирроза в печени. Потому что иммунная система человека хоть и борется с этой инфекцией, но в большинстве случаев малоэффективно. Воздействие иммунной системы практически не затрагивает этот вирус.

Другие маркеры гепатита С

Точный механизм повреждения клеток до сих пор неизвестен. Большинство случаев появляются в крупных эпидемиях. В эндемичных регионах вирус составляет более 50% случаев острого гепатита, как у детей, так и у взрослых. В отличие от гепатита А передача от человека к человеку нечастая, возможно, из-за небольшого количества вирусных частиц, выделяемых в фекалиях инфицированных людей. Большинство случаев в неэндемичных регионах относятся к числу туристов, возвращающихся из районов с высокой распространенностью.

Не исключается возможность заражения при контакте с домашними животными или при проглатывании свинины или овец. Он представляет типичные клинические характеристики, сходные с другими типами вирусных гепатитов, за исключением высокой смертности у беременных женщин, варьируя от 5 до 25%. Менее распространены артралгия, диарея, зуд и крапивница.

Возбудитель hcv проникает в организм через жидкую часть крови – плазму и эякуляторную жидкость – сперму. В кровь возбудитель заболевания может попасть через использование нестерильного медицинского инструмента, также зараженные приборы, при нанесении татуажа и прокалывания кожи для ношения пирсинга.

Использование донорской крови и органов может привести к заражению человека вирусом hcv. От больной матери к ее ребенку во время родов также возможна передача этого патогенного микроорганизма.

С момента проникновения антигена в человеческий организм проходит несколько недель, прежде чем начинается выработка hcv-антител, которые выявляются в анализе крови неожиданно для больного. Это заболевание может проявить себя симптомами ОРВИ и протекать без желтухи и болей в правом подреберье, что не дает возможности заподозрить серьезную патологию.

Методы исследования для диагностики гепатита С

Чтобы определить наличие антител anti-hcv, необходимо сдать кровь на анализ, это поможет диагностировать гепатит С на ранних сроках. Нужно помнить, что после заражения должно пройти не менее шести недель, только в этом случае результат будет точным.

Существует определенная группа риска, состоящая из людей, ведущих беспорядочную половую жизнь, и наркоманов. Им обязательно нужно сдавать кровь для выявления anti-hcv маркеров. Также этот анализ сдают беременные, доноры и люди, которым предстоит перенести оперативное вмешательство.

Анализ крови на наличие hcv-антигена назначается при ряде симптомов, проявляющихся в организме человека:

1. Когда наблюдается гепатит с невыясненной этиологией, и нужно определить его форму, а также степень поражения.
2. Тошнота, потеря веса, отсутствие аппетита, развитие желтухи и ломота в теле.
3. Выявление причин, вызвавших воспалительные печеночные патологии и сопутствующих заболеваний.
4. Увеличение показателей АЛТ и АСТ, в составе крови.
5. При противовирусном лечении и для диагностирования вируса.

Проводится забор крови из венозного русла утром натощак. Перед сдачей крови курение запрещается, можно пить только воду. Употребление жирной и жареной пищи, алкоголя нужно ограничить и не принимать за день до сдачи анализа.

Исследования крови проводятся в лабораторных условиях с применением серологических тестов и ПЦР-диагностики, а также радиоиммунного и иммуноферментного метода. Существуют экспресс – тесты для распознавания заболевания на дому.

Из-за высокой способности к мутациям возбудителя гепатита С, выявить сложно. Он за кратчайшие сроки может менять свои антигенные особенности и не определяться диагностическими тестами.

Результаты анализа крови

При использовании различных антигенных комплексов, как реагентов для выявления известных типов возбудителей гепатита С, проводятся исследования крови, точнее ее жидкой части.

Полученные результаты можно представить по обнаруженным в нем видам антигенных комплексов:

1. Когда anti hcv total отрицательный, что это значит для человеческого организма? Можно с уверенностью сказать, что возбудителя гепатита С в нем нет.
2. Наличие положительного результата anti – hcv, указывает на развитие заболевания гепатита С, которое может носить хроническую или острую форму, а также свидетельствовать о перенесенном в прошлом заболевании, вовремя выявленного и пролеченного.
3. При установлении в крови anti – hcv igG можно утверждать развитие хронического течения гепатита С.
4. Если anti – hcv igG сочетается с anti – hcv igM, тогда говорят об обострении хронического процесса.

Этот анализ – единственный быстрый и безвредный информативный способ для выявления такого опасного заболевания, как гепатит.

Анти-HCV – анализ на гепатит С, назначаемый врачом в процессе диагностики вирусной инфекции. Тест основан на особенностях ответа иммунной системы человека при попадании патогена внутрь клеток. При этом происходит выброс в кровь биологически активных веществ – иммуноглобулинов (в медицинской литературе обычно обозначаются сокращенно Ig).

Вырабатывающиеся антитела (АТ) специфичны, то есть их структура четко предопределена в зависимости от разновидности патогена. На этом и построен принцип серологического иммуноферментного исследования, которое получило название анализ ИФА анти-HCV.

Строение и содержание синтезирующихся иммуноглобулинов находится в прямой зависимости от структурных единиц вириона гепатита С. HCV (hepatitis C virus) представляет собой патоген округлой формы, диаметр не превышает 50 нм. В середине располагается одна нить РНК, покрытая капсидом (core-протеином). Снаружи его окружает оболочка, основу строения которой составляют липиды, а вкрапления гликопротеинов Е1 и Е2 имеют вид выступов.

Структуру генома вируса можно представить в виде схемы:

Современный анализ HCV основан на выявлении нескольких маркеров инфекции. Это РНК вируса, core-антиген и специфические антитела. Раньше других в сыворотке крови определяется именно РНК ВГС (вирусного гепатита С). Второй по времени показатель – core-антиген. Его можно обнаружить через неделю после появления РНК в количестве достаточном, для идентификации тест-системами.

Чувствительность анализа на антиген вируса гепатита С зависит от механизма проведения исследования. При хемилюминесцентной детекции она значительно выше (до 0,06 пг/мл), чем при классической иммуноферментной реакции при помощи окисления хромогена пероксидазой. Но чем выше чувствительность анализа, тем дороже система для тестирования.

Уровень РНК вируса в крови тесно связан с концентрацией core-антигена. Так, некоторые методики позволяют определить приблизительную вирусную нагрузку с учетом коэффициента корреляции.

Специфические антитела к вирусу гепатита С определяются при помощи скрининговых иммуноферментных и иммуноблоттинговых тест-систем. Последние отличаются более высокой специфичностью.

Ориентировочный срок появления РНК вируса, антигена и различных типов иммуноглобулинов приведен в таблице:

Маркеры	Сроки выявления в крови при помощи стандартных анализов
HCV RNA	1–2 неделя
Core-Ag	3 неделя
Anti-HCV IgM	4–7 неделя
Anti-core IgG и Anti-NS3 IgG	5–8 неделя
Anti-NS4A|B IgG и Anti-NS5A IgG	6–9 неделя
Anti-HCV IgG	Начиная с 9 недели

Большинство применяемых в настоящее время тест-систем были разработаны еще в начале 1990-х годов. При необходимости диагностировать вирус используются антигены, полученные по образцам изолятов 1990-х, соответствующих HCV генотипа 1а. Уже есть информация об отсутствии у некоторых пациентов АТ к core-антигену – одному из самых иммуногенных антигенов ВГС. Это связывают с появлением определенных мутаций. Поэтому, чтобы исключить сомнительные результаты, следует обращаться в лаборатории, работающие с современными тест-системами (производства Abbott, Bayer и др.).

Анти-HCV: что это за анализ?

Существует несколько типов диагностических тестов на гепатит С, которые выполняются при помощи серологической иммуноферментной реакции.

Каждый из них дает специалисту определенную информацию. Это:

• предполагаемое наличие заболевания;
• форма течения вирусной инфекции;
• срок с момента инфицирования;
• реакция иммунной системы на проникновение патогена в кровоток;
• состояние пациента после приема медикаментов либо по итогам самостоятельного выздоровления после острой фазы заболевания.

Описание анализа на суммарные антитела

Исследование начинают с теста Anti-HCV Total, предназначенного для определения суммарных антител (IgG + IgM). Проведение других анализов целесообразно в том случае, если анти HCV положительный: что это значит, может определить только врач. Дело в том, что у некоторых пациентов отмечают ложноположительный результат, что требует дополнительного обследования.

Исследование на антитела к основным структурным белкам HCV

Наиболее показателен анализ крови на core-Ag. Иммуноглобулины к этой структурной субъединице появляются раньше других и служат специфическим лабораторным маркером инфицирования. Но вместе с тем, если АТ не обнаружены, это не исключает заражения. Отрицательный результат может быть обусловлен либо мутацией самого HCV, либо индивидуальными особенностями пациента.

Дальнейший скрининг на гепатит С включает анализ крови анти-HCV на определение спектра различных типов иммуноглобулинов. Так, обнаружение антител класса IgM свидетельствует об остром течении инфекции, анти – HCV IgG говорит в пользу длительной, хронической или латентной формы вирусного заболевания. Но расшифровку результатов должен проводить специалист, который объяснит, что это за анализ, и даст рекомендации по дальнейшему обследованию и лечению.

Точность

Точность иммуноферментного исследования зависит от производителя диагностических тест-систем. Не последнюю роль играет и профессионализм медицинского персонала. Специфичность и достоверность подобного исследования достигает 90%. Поэтому положительный анализ на гепатит С, проведенный серологическим методом, однозначно служит показанием для дальнейшей диагностики.

Но перед тем как сдавать кровь на HbsAg HCV или другие ИФА, необходимо поинтересоваться, на каком оборудовании будет проводиться анализ. При появлении каких-либо вопросов, лучше обратиться к врачу. Качество выполненного исследования полностью определяет тактику проведения дальнейшей диагностики.

Методика проведения анализа на гепатит С

Иммуноферментный анализ на гепатит С относят к серологическим методам исследования.

Тест-системы, при помощи которых выполняется ИФА, делят на несколько групп в зависимости от применяемых типов антител:

• лизатные, в ходе исследования применяют нативные АТ, полученные из культуры;
• рекомбинантные, используют синтезированные при помощи генной инженерии белковые структуры, аналогичные по строению с исследуемым антигеном;
• пептидные, применяют искусственно синтезированные пептиды.

В качестве твердой фазы обычно используют 96-луночные планшеты, реже – полистироловые шарики. Катализируют ИФА ряд специфических биологически активных ферментов.

Проведение иммуноферментного анализа проводится в несколько этапов:

1. Происходит распознавание исследуемого образца антителом. Результат определяют по количеству образовавшихся иммунных комплексов или остаткам свободных мест специфического связывания.
2. Формирование меченного ферментами соединения.
3. Трансформация ферментной метки в определенный сигнал, который регистрируется при помощи какого-либо физико-химического метода (спектрофотометрия, флуориметрия, люминесценция и т.д.).

Существуют такие типы иммуноферментного анализа, выполняемого для диагностики вирусного гепатита С:

• «сэндвич»-метод;
• непрямой ИФА;
• конкурентный метод ИФА;
• ингибирующий ИФА;
• прямой ИФА.

Предварительно пациенту необходимо взять направление от врача. В частной лаборатории сдать анализ можно и без соответствующих документов. Непосредственно перед исследованием медсестра регистрирует данные больного и соответствующим образом маркирует пробирки.

Забор крови осуществляется из вены. Предварительно кожу обрабатывают стерильной салфеткой с дезинфицирующим раствором. После процедуры рану заклеивают одноразовым пластырем. Сроки постановки иммуноферментной реакции составляют от 1 до 5 дней. Результат можно забрать либо непосредственно в лаборатории, либо получить в электронном виде на почту или по коду на сайте.

Показания для ИФА

Обратиться к врачу, а впоследствии и сдать кровь на суммарные антитела к гепатиту С необходимо при возникновении специфических признаков инфекции.

Заподозрить патологию можно по следующим симптомам:

• почти не проходящее чувство усталости;
• нарушения сна (обычно в ночное время суток человек мучается от бессонницы, а в дневное – от сонливости);
• снижение концентрации внимания, замедление остроты умственной деятельности;
• снижение аппетита;
• неприятное чувство распирания, тяжести и дискомфорта в правом подреберье;
• нарушения пищеварения, сопровождающиеся метеоризмом, расстройствами стула, изжогой, отрыжкой, неприятным привкусом во рту;
• желтизна (часто, незначительная и быстро проходящая) кожного покрова, белков глаз.

Но более чем у половины инфицированных вирусная инфекция протекает без выраженной клинической картины, а возникающие признаки легко спутать с ОРВИ или банальным переутомлением. Именно поэтому гепатит С часто выявляют непреднамеренно в ходе подготовки к диспансеризации.

Строгими показаниями к сдаче крови для анализа служат:

• характерные для нарушения функции печени симптомы;
• общее недомогание;
• отклонения от нормы при расшифровке результатов печеночных проб;
• контакт с человеком, у которого подтвержден диагноз гепатита С (половой акт, соприкосновение с кровью или слизистыми и т.д.);
• наличие ВИЧ;
• гемотрансфузия или пересадка органов, выполненная до 1992 года;
• регулярное прохождение процедуры гемодиализа;
• заболевания, требующие частых инвазивных медицинских манипуляций;
• у детей, рожденных от инфицированных HCV матерей;
• оформление медицинской книжки для военнослужащих, работников в сфере торговли, здравоохранения, образования, косметологии, фармации.

Обязательным является проведение ИФА при беременности. Исследование выполняют на 12 и 30 неделе.

Не стоит забывать о таком понятии, как «серологическое окно». Под этим термином подразумевает срок, прошедший с момента инфицирования до времени, когда выявляется вирус, а точнее – вырабатываемые к его антигенам антитела.

Повторное проведение ИФА назначают при:

• неопределенных результатах первого анализа;
• прохождении противовирусной терапии (для контроля титра антител);
• Anti-HCV Total отрицательном, но сохранении симптомов вирусного гепатита.

По мнению специалистов, риску заражения подвергается практически каждый посетитель стоматологического или косметологического кабинета. Поэтому с целью профилактики Анти ВГС Тотал (определение суммарных антител методом ИФА) рекомендуют сдавать ежегодно.

Как подготовиться

Достоверность полученных результатов анализа во многом зависит от правильной подготовки пациента. Рекомендации специалистов включают:

• не есть за 12–14 часов до сдачи крови;
• за 3–4 часа до анализа отказаться от курения;
• сдают кровь в первой половине дня;
• после пробуждения нельзя ничего пить кроме негазированной воды;
• за 3–4 дня до исследования исключить жирную пищу, жареные блюда, приготовленные с большим количеством масла, «тяжелые» соусы (майонез, тартар и т.д., особенно покупные), фастфуд (включая снеки и закуски), колбасные изделия, копчености, сушеную, вяленую рыбу и/или мясо, в целом меню перед анализом должно составляться по диете №5;
• за 7–10 дней до ИФА категорически противопоказаны спиртные напитки (вне зависимости от крепости).

В целом перед сдачей крови необходимо придерживаться принципов рационального правильного питания, по возможности отказаться от вредных привычек.

При обращении к врачу с результатами анализа необходимо сообщить обо всех принимаемых медикаментах, возможных нарушений правил подготовки к исследованию, сопутствующих заболеваниях. Также следует рассказать о беспокоящих симптомах, даже если, на первый взгляд, они не имеют отношения к поражению печени.

Расшифровка полученных результатов

Расшифровка Anti HCV должна проводиться профильным специалистом (инфекционистом или гепатологом). В норме антител к гепатиту С в организме человека не должно быть.

Однако ложноотрицательный результат возможен при:

• периоде «серологического окна»;
• сопутствующем иммунодефиците (при вирусном поражении иммунитета выработка АТ прекращается);
• онкологических поражениях системы кроветворения.

Ложноположительный результат ИФА HCV AgAt иногда отмечают при:

• беременности (из-за выработки специфических белковых соединений, схожих по структуре с иммуноглобулинами);
• аутоиммунных патологиях (при таких заболеваниях продукция антител носит непредсказуемый характер);
• нарушениях системы кроветворения;
• выздоровлении после фазы острого гепатита С (у некоторых людей вирус уничтожается иммунной системой без медикаментозной терапии);
• предшествующей противовирусной терапии (иммуноглобулины могут сохраняться до 3–5 лет и более);
• у ребенка до 3 лет при рождении после беременности у инфицированной или прошедшей лечение матери;
• сопутствующих тяжелых инфекциях (вне зависимости от их этиологии), в таком случае ошибочные результаты возможны из-за массивного выброса антител в ответ на вирусное или бактериальное поражение тканей.

Расшифровку результатов иммуноферментного анализа можно представить в виде таблицы:

Начиная с 9 недели	Результат и описание возможной патологии
Определение суммарных антител (Anti-HCV Total analiz)

• проведение ИФА на IgG и IgM;
• выполнение качественной ПЦР.

Отрицательный означает, что человек здоров. Но подтверждающими анализами для исключения инфекции служит ПЦР (качественное определение РНК вируса) или повторное ИФА через 4–8 недель.

ИФА Core-Ag Положительный результат свидетельствует о недавнем инфицировании Anti-HCV IgM Позитивный тест возможен при остром гепатите С. Если одновременно выявлены IgG вероятно обострение хронически протекающего вирусного процесса IgG (к различным структурным белкам) Обнаружение говорит в пользу хронического HCV

При обнаружении иммуноглобулинов в бланке с результатами анализов в обязательном порядке указывается их титр (концентрация). Таким образом врач может судить об интенсивности патологического процесса и оценить иммунный ответ. Но точную информацию о количественном содержании вируса в организме человека может дать только выявление РНК методом полимеразной цепной реакции.

Тест на определение антител к возбудителю гепатита С в настоящее время используется в качестве «золотого стандарта» первичной диагностики заболевания. Исследование получило название анти-HCV. Методика выполнения теста позволяет определить титр иммуноглобулинов, что определяет активность иммунного ответа.

Некоторые разновидности анализа способны дифференцировать различные типы антител, что является определяющим фактором в постановке диагноза острого или хронического гепатита С. При наличии показаний возможно выявление иммуноглобулинов к специфическим структурным протеинам патогена. Такое исследование проводят редко, но оно помогает определить причину резистентности к терапии и оценить возможность развития осложнений.

Что значит Анти-HCV?

Анализ крови анти-HCV предназначен для обследования человека на предмет гепатита С. Что это за тест? Принцип исследования состоит в выявлении антител (иммуноглобулинов или АТ). Иммуноглобулины – специфические вещества протеиновой структуры, которые вырабатываются для защиты организма от бактерий и вирусов. Антитела способны «распознать» частицы болезнетворных патогенов, которые могут нанести необратимый урон здоровью.

Такие частицы именуют антигенами. Задача АТ – уничтожить их до наступления необратимых изменений. Иммуноглобулины отличаются высокой специфичностью. Иными словами, к каждому антигену вырабатываются определенные, уникальные по структуре антитела. Соответственно, если в организме обнаружены АТ к гепатиту С, то это свидетельствует о произошедшем инфицировании.

Пациенты часто спрашивают, если анализ анти-HCV положительный, что это значит? Зачастую такие результаты говорят о заражении. Но при проведении скрининга на иммуноглобулины возможно получение ложных (как позитивных, так и негативных) анализов. Дело в том, что результаты исследования Anti-HCV зависят от особенностей работы иммунной системы. К примеру, беременность и аутоиммунные заболевания могут продемонстрировать ложные маркеры теста.

Когда пациенты интересуются, что это за анализ, доктора разъясняют, что существует несколько разновидностей исследования. Типы тестов для выявления антител описаны в таблице.

Достоверность

Практически все современные клинические лаборатории сейчас перешли на тест-системы последнего поколения. Их точность и специфичность превышает 98%. Поэтому возможные сомнительные результаты обычно связаны не с человеческим фактором либо качеством используемого для диагностики набора реактивов, а с особенностями работы иммунной системы больного.

Именно из-за этого положительный анализ на гепатит С иммуноферментным методом (ИФА) не служит основанием для постановки диагноза. Результат ИФА требует обязательного подтверждения более специфичным тестом на наличие РНК патогена в крови, выполняемого способом полимеразной цепной реакции (ПЦР). Точность последнего также приближается к 100%.

Сравнительно недавно в продаже в аптеках появились экспресс-тесты, направленные на выявление антител и позволяющие провести анализ HCV самостоятельно дома. Их преимуществом служит возможность выполнения без медицинской помощи. Подобный набор не заменит полноценного лабораторного анализа, но поможет провести самодиагностику и вовремя обратиться к врачу. Точность экспресс-тестов составляет порядка 95%. Но для минимизации риска неправильных результатов нужно соблюдать все правила выполнения анализа. Подробная инструкция по использованию тест-системы прилагается к набору. Существуют экспресс-тесты для выявления антител как в крови, так и в слюне.

Как проводят анализ на гепатит С

Серологический анализ на гепатит С выполняется с использованием одной из следующих методик:

• ELISA (от английской аббревиатуры «enzyme linked immunoadsorbent assay), исследование проводят при помощи реагентов-адсорбентов, которые обладают специфической способностью связывать иммуноглобулины в биологическом образце;
• EIA (enzyme immunoassay), результаты теста основаны на биохимической реакции антител с содержащимися в реактивах специфическими ферментами.

Существуют и другие методики выполнения анализа ИФА анти-HCV (например, EMIT), но они используются гораздо реже. ELISA и EIA просты в применении, доступны в финансовом плане, подходят для работы с большим количеством образцов. Во время исследования находящиеся в крови антитела образуют соединения со специфическими реагентами. Впоследствии они обнаруживаются либо при микроскопическом исследовании, либо при обработке образца при помощи специальных компьютерных программ. Таким образом возможен двойной контроль результатов исследования.

В качестве реактивов могут использоваться различные соединения:

• лизатные, полученные путем очищения патогена (для этой цели обычно применяют ультразвук);
• рекомбинантные, когда реагенты получают генно-инженерным путем;
• пептидные с применением искусственно полученных веществ.

В зависимости от используемого реагента тест-системы могут определять либо суммарные антитела, либо дифференцировать иммуноглобулины на G и М. В качестве твердой фазы применяют луночные планшеты либо шарики, лидируют в производстве таких устройств корпорации Roche или Abbot.

Показания для исследования ИФА

Тестирование на HCV (Hepatitis C Virus) проводится как в качестве рутинного исследования для регулярного обследования работников некоторых сфер (образования, здравоохранения), при планировании зачатия и т.д. Также анализ ИФА Тотал на суммарные антитела к гепатиту С выполняется и при подозрении на вирусное поражение печени.

ИФА является основным первичным методом диагностики заболевания. Остальные тесты проводятся по результатам этого исследования.

Проведение ИФА строго показано в следующих случаях:

• перенесенные до 1992 года гемотрансфузионные процедуры и хирургические вмешательства по поводу трансплантации органов (до этого времени не были известны методы выявления HCV у доноров и в биологическом материале);
• пристрастие к внутривенным наркотикам: применение психоактивных веществ ослабляют иммунную систему и делают организм более восприимчивым к подобного рода заболеваниям;
• использование общих с инфицированным человеком предметов гигиены;
• половые контакты с больным (особенно, гомосексуальные);
• инфицирование ВИЧ;
• при беременности;
• повышение уровня печеночных ферментов;
• любые иммунодефицитные состояния;
• работа с сфере здравоохранения.

Людям из группы риска рекомендуют регулярно сдавать кровь на HBsAg, HCV и HIV (гепатиты В и С, ВИЧ ).

Также исследование показано и при появлении определенных клинических признаков, которые могут косвенно указывать на наличие поражения печени вирусной этиологии. Это:

• постоянное чувство слабости;
• головные боли;
• сонливость;
• расстройства пищеварения (тошнота, изжога, диспепсия, диарея либо запор, неприятный привкус во рту);
• желтуха;
• потемнение урины;
• осветление кала.

Относительными показаниями к проведению иммуноферментного теста на ВГС служат:

• нанесение татуировок, перманентного макияжа, выполнение пирсинга;
• ведение беспорядочной половой жизни;
• проведение частых лечебных процедур (гемодиализа, эндоскопии);
• планирование беременности (тестирование проходят оба партнера);
• регулярные посещения маникюрных кабинетов.

В некоторых структурах результаты ИФА требуют при приеме на работу и далее ежегодно. С этой целью оформляется медицинская книжка, куда вносится не только тест на гепатит С, но и другие обследования и рекомендации врача.

Как правило, это касается:

• работников здравоохранения, которые непосредственно контактируют с пациентами или донорским материалом;
• продавцов;
• поваров, официантов и других служащих сферы общественного питания;
• учителей, воспитателей в детских садах и другого персонала школ, интернатов, дошкольных детских учреждений, образовательных и развлекательных центров;
• косметологов и парикмахеров;
• мастеров в тату- и пирсинг-салонах.

В целом, риску заразиться гепатитом С подвергается почти каждый человек. Сейчас для выполнения теста вовсе не обязательно обращаться к врачу, брать направления и тратить несколько часов на ожидание в очереди. Анализ проводится практически в каждой частной лаборатории, а цена его вполне доступна. Забор крови занимает несколько минут, а результат выдают на руки либо присылают по указанному в бланке электронному адресу в течение 1–3 дней.

Правила подготовки к лабораторному тесту

Иммуноферментное исследование для выявления гепатита С зависит не только от качества используемых тест-систем и профессионализма лаборанта, проводящего анализ. На результаты также влияет и особенности подготовки к забору крови. В первую очередь это касается пациентов, страдающих от хронических заболеваний и вынужденных принимать медикаменты.

Таким больным следует:

• за 7–10 дней до предполагаемого обследования предупредить врача о необходимости сдачи анализов и возможности сделать перерыв в приеме лекарств;
• если прием медикаментов не требует соблюдения временного режима, пить препараты (делать укол) следует после забора крови;
• некоторые средства обладают иммуносупрессивной активностью (лекарства, назначаемые для терапии онкологических заболеваний, цитостатики, иммунобиологические медикаменты);
• длительный прием антибиотиков, противомикробных, противопаразитарных средств и некоторых других препаратов может негативно отразиться на состоянии печени, поэтому о курсе такого лечения следует известить доктора.

На консультации перед сдачей крови либо при обращении к врачу по поводу расшифровки анализа необходимо обязательно сообщить о любых проблемах со здоровьем, а тем более, об известных диагнозах и принимаемых лекарствах.

Чтобы снизить вероятность сомнительных, неопределенных результатов доктор и консультанты в клинической лаборатории неоднократно предупреждают о необходимости соблюдать определенные правила.

К числу обязательных врачебных рекомендаций относят:

1. Специальную диету – за 3 дня до обследования. Питание по столу №5 рекомендовано при подтвержденном поражении печени вирусного либо другого генеза. Но на этапе подготовки к проведению исследования также нужно придерживаться диеты. Не следует есть жирные сорта птицы, мяса и рыбы, молока и кисломолочных продуктов, некоторые сыры, мясные субпродукты, соусы, колбаса, ветчина, сосиски, консервы. Рекомендуют ограничить употребление соли, противопоказаны маринованные овощи и фрукты, жареные блюда, фаст-фуд, сдоба.
2. Полное исключение алкоголя вне зависимости от объема и крепости напитков. Такое правило соблюдают как минимум 2 недели до забора крови.
3. Воздержание от приема пищи (разрешена только негазированная вода) за 12 часов до посещения лаборатории.
4. Не курить 8–10 часов до сдачи крови.
5. Посещение лаборатории утром после пробуждения.
6. За сутки до исследования ограничить тяжелые физические нагрузки.

Исследование лучше перенести, если:

• развилась бактериальная инфекция (вне зависимости от этиологии, например, ангина, пневмония, пиелонефрит);
• возникла необходимость в приеме антибиотиков, противоглистных средств, фунгицидных препаратов (анализ лучше выполнять через 7–10 дней после окончания курса терапии).

Симптомы ОРЗ и других заболеваний следует дифференцировать от признаков гепатита С. Зачастую вирусное поражение печени дает о себе знать гриппоподобной симптоматикой.

При нарушении правил подготовки к проведению исследования, лучше перенести анализ. Если же это по каким-либо причинам сделать невозможно, нужно известить доктора. Иногда подобные обстоятельства могут стать причиной получения ложноположительных либо ложноотрицательных результатов.

Расшифровка результатов анализа крови

Идеально, если расшифровка Anti-HCV проводится профильным специалистом. Но при сдаче анализа в частной лаборатории пациент получает результаты лечения еще до посещения врача. Редкий человек сможет дождаться консультации доктора и не поинтересоваться, выходят ли показатели за пределы физиологически допустимых значений.

В норме Anti-HCV Total отрицательный, это значит, что антител к возбудителю гепатита С в крови человека не обнаружено.

Основные принципы интерпретации различных вариантов результатов серологического исследования приведены в таблице. Также указана цель выполняемого теста.

Является основой диагностики гепатита С.

Возможные результаты:

• антитела обнаружены (с указанием титра) – с большой степенью вероятности человек инфицирован;
• антитела не обнаружены – в большинстве случаев результат свидетельствует о том, что человек не заражен HCV либо срок сдачи анализа пришелся на «диагностическое окно»

Может выполняться как вместо Anti-HCV Total, так и при обнаружении суммарных антител.

Возможные результаты:

• иммуноглобулины отсутствуют – человек здоров (за исключением вероятности ложноположительных результатов);
• обнаружены Anti-HCV IgG – хроническая форма гепатита С либо ранее перенесенное заболевание:
• обнаружены Anti-HCV IgМ – такой тип иммуноглобулинов говорит об остром течении вирусной инфекции

Как и любое другое исследование, ИФА на антитела к HCV сопряжены с риском получения ошибочных результатов.

Помимо технической ошибки в проведении анализа, ложные позитивные либо негативные данные возможны при:

• беременности;
• аутоиммунных заболеваниях (особенно, аутоиммунном гепатите);
• лейкемии и других видах онкологии;
• ВИЧ;
• ранее перенесенном гепатите С (как после противовирусной терапии, так и при самостоятельном выздоровлении, которое отмечают в 10–15% случаев инфицирования);
• тяжелых системных инфекциях, когда в кровь происходит постоянный выброс большого количества антител, что и является причиной погрешности в анализе;
• любых состояниях, связанных с серьезным иммунодефицитом (включая медикаментозный).

Еще одной причиной ложного результата является так называемое «диагностическое окно». Это период с момента инфицирования до накопления в крови человека антител в количестве, необходимом для лабораторной диагностики. Сроки, когда выявляется HCV методом ИФА, индивидуальны, но в среднем составляют 6–8 недель.

Проведение серологического исследования нецелесообразно для диагностики патологии у ребенка, рожденного от больной матери. Если вероятность внутриутробной и интранатальной передачи вируса не превышает 5–7% (исключение составляют женщины с ВИЧ, у них риск составляет порядка 20–25%), то IgG проходят через плаценту и обнаруживаются в крови ребенка. Поэтому в данном случае исследование на HCV всегда проводят при помощи ПЦР.

Учитывая возможность получения ложных результатов, доктора всегда назначают подтверждающий тест по методике качественной ПЦР.

ИФА остается главным рекомендуемым методом быстрой диагностики гепатита С. Данный тест проводится повсеместно. Но во избежание ошибок с результатами анализа лучше обратиться к врачу за более комплексным обследованием (особенно при негативном ИФА на фоне ухудшающегося самочувствия).