ВРЕМЯ СВЁРТЫВАНИЯ КРОВИ — показатель общей коагулирующей активности крови. Охватывает время от момента контакта крови с чужеродной поверхностью in vitro до формирования сгустка. Этот тест характеризует замедленную фазу свертывания крови.
Существует много методов определения В. с. к., каждый из к-рых имеет свои нормативы. Для определения В. с. к. используют капиллярную или венозную кровь. При исследовании капиллярной крови прокол пальца всегда делают приблизительно одной глубины, а первую выступившую из прокола каплю обязательно удаляют (примесь тканевой жидкости может исказить результат). При применении любого метода строго соблюдают стандартные условия и пользуются иглами и пробирками определенного диаметра, следят за температурным режимом и т. д.
Метод Фонио (A. Fonio, 1928) широко распространен в клинической практике. Готовят влажную камеру: в чашку Петри кладут марлю, смоченную водой. Кровь берут из вены в количестве 10 капель на часовое стекло, к-рое помещают во влажную камеру. Концом запаянной пастеровской пипетки осторожно проводят по поверхности крови. Появление первых нитей фибрина считают началом свертывания, образование сгустка — концом свертывания. Начало свертывания крови в норме наблюдается через 5—8 мин., конец — через 15—18 мин.
Метод Ли—Уайтa (R. I. Lee, P. D. White, 1913) более чувствителен, чем метод Фонио. Кровь извлекают из вены иглой при помощи сухого парафинированного или силиконированного шприца и разливают по 1 мл в четыре абсолютно чистые сухие пробирки, находящиеся в водяной бане при t° 37°. Пробирки осторожно поворачивают каждые 30 сек. до тех пор, пока кровь не перестает отделяться от стенок. Секундомер включают при поступлении в шприц первых капель крови и останавливают после полного ее свертывания. В. с. к. в каждой пробирке измеряют отдельно, а затем вычисляют средний результат. Норма — 6—10 мин.
Модификация метода Ли — Уайта (известная в литературе как метод Жака — Фидлера — Мак-Донелда). Для исследования используют силиконированные пробирки, что позволяет выявить малые дефекты свертывания; в норме В. с. к. в силиконированных пробирках составляет 18—25 мин. При большой разнице в результатах, полученных в простых и силиконированных пробирках, можно предположить дефицит фактора XII— фактора Хагемана (ем. Геморрагические диатезы).
Метод Бюркера (1910). Капля крови, взятая после прокола пальца без надавливания, смешивается на часовом стекле с каплей дистиллированной воды; стеклянной палочкой с оттянутым концом помешивают до появления первых нитей фибрина. В норме свертывание наступает через 5—5 1/2 мин.
Метод Мас-и-Магpо (Мас-Марго) (F. Mas у Magro, 1915). На парафинированное часовое стекло пипеткой Сали наливают капли вазелинового масла. Этой же пипеткой из пальца насасывают 20 мкл крови и осторожно выдувают ее на вазелиновое масло. Одновременно включают секундомер. Через каждые 2 мин. кровь втягивают в пипетку. Секундомер останавливают в момент, когда кровь уже не втягивается в пипетку. В норме свертывание крови наступает через 8—12 мин.
Метод Ситковского — Егорова (1913). Исследование проводят в аппарате Ситковского: в специальном капилляре, помещенном в воду при t° 37°, кровь передвигают, нагнетая давление. Начало свертывания определяют по появлению первого сгустка. Затем через 20 сек. вновь повышают давление каждые 5 сек. до момента, когда кровь остается неподвижной (при давлении в системе в 60 мм рт. ст.). Это соответствует концу свертывания (норма — 3—4 мин.).
Значение определения времени свертывания крови
В. с. к. не характеризует состояния гемостаза полностью. Напр., при афибриногенемии и гипергепаринемии свертывания крови практически не происходит, а геморрагии могут быть выражены умеренно. Наоборот, при тяжелой тромбоцитопении В. с. к. обычно не увеличено, а кровоточивость может быть выраженной. Наиболее часто В. с. к. удлинено при гемофилии, однако также не всегда адекватно тяжести заболевания.
См. также Кровь, методы лабораторного исследования, Свертывающая система крови.
Библиогр.: Руководство по клиническим лабораторным исследованиям, под ред. Е. А. Кост и Л. Г. Смирновой, с. 76, М., 1964; Справочник по клиническим лабораторным методам исследования, под ред. Е. А. Кост, с. 90, М., 1975; Справочник по функциональной диагностике, под ред. И. А. Кассирского, с. 434, М., 1970; Lee R. I. a. White P. D. A clinical study of the coagulation time of blood, Amer. J. med. Sci., v. 145, p. 495, 1913.
Метод Ли-Уайта (время свертывания венозной крови)
Подготавливают водяную баню с температурой 37 град. Цельсия, секундомер. Из вены забирают 1 мл крови, помещают в пробирку, которую устанавливают на водяную баню и включают секундомер. Через 2 минуты, а затем через каждые 30 секунд пробирку наклоняют под углом 45 градусов и наблюдают образование плотного сгустка (кровь не выливается при переворачивании пробирки). Время свертывания регистрируют от момента ее взятия до образования плотного сгустка. В норме 5-10 минут.
Метод Бюркера (свертывание капиллярной крови)
На стекле смешиваются равные по объему капли крови и дистиллированной воды. Включается секундомер и путем помешивания образовавшейся смеси регистрируется образование нитей фибрина.
Определение времени кровотечения по Duke
Определить время и интенсивность кровотечения по Дюку. Обработать палец спиртом или эфиром. Сделать прокол мякоти пальца на глубину 3-3,5мм. Включить секундомер и снимать капли фильтровальной бумагой каждые 30 сек. Секундомер выключается в тот момент, когда на бумаге не останется следа крови. В норме время кровотечения равно 2-4 мин.
Для определения интенсивности кровотечения число капель крови на фильтровальной бумаге делят на время кровотечения. В норме она равна 2-3.
Увеличение времени кровотечения и интенсивности свидетельствует о нарушении сосудисто-тромбоцитарного гемостаза.
Определение осмотической стойкости эритроцитов
Известно, что в гипотонических растворах эритроциты набухают и лопаются, в результате чего гемоглобин выходит в окружающую среду. Это явление называется гемолизом. В крови человека имеются эритроциты, обладающие различной устойчивостью к действию гипотонических растворов. Необходимо определить максимальную концентрацию хлористого натрия, при которой начинается (минимальная осмотическая стойкость) и заканчивается (максимальная осмотическая стойкость) гемолиз. С этой целью из рабочего (1%) раствора хлорида натрия готовится серия разведений по следующей схеме:
В каждую пробирку вносится по капле крови, которую тотчас же перемешивают с раствором и оставляют стоять при комнатной температуре в течение 10 мин. Для здоровых людей верхняя (минимальная) граница осмотической стойкости соответствует 0,42-0,48% NаСl. При этом разрушаются наименее устойчивые к осмотическому давлению эритроциты. Полный же гемолиз (максимальная граница стойкости) происходит при 0,30-0,34% NаСl.
Расшифровка агрегатограммы
Агрегатограмма записывается с помощью прибора, получившего название агрегометр. К сожалению, мы не можем воспользоваться на занятиях этим прибором, ибо у нас он предназначен лишь для научной работы. Принцип записи агрегатограммы основан на изменении оптической плотности плазмы, содержащей тромбоциты, в которую вносится один из агрегирующих агентов (АДФ, адреналин, коллаген, тромбоксан А2, антибиотик ристомицин и др.). При этом регистрируется кривая, схема которой изображена на рисунке. В норме агрегатограмма носит двугорбый характер, хотя в зависимости от дозы агрегирующего агента можно получить и одногорбую прямую, а также агрегацию с последующей дезагрегацией (возвращение кривой к исходной величине) (см. рисунок).
Обычно агрегатограмма включает в себя латентный период АВ (момент внесения агрегирующего агента до начала записи агрегатограммы), величину максимальной амплитуды (МА), угол агрегации, время наступления максимальной агрегации и время дезагрегации (СД), если он наступает.
В норме для первой волны индекс агрегации (процент агрегированных тромбоцитов) равен 25-35%, время агрегации колеблется в пределах 30-35 сек, угол агрегации 60-65 градусов.
Нормы для второй волны агрегации: индекс агрегации – 60-70%, время агрегации – 90-100 сек, угол агрегации – 50-60 градусов.
После помещения индуктора в норме агрегация должна наступать не позднее, чем через 20-30 сек. (АВ). Следует помнить, что цена данного деления на агрегатограмме равна 20 сек (1 см ленты). Как правило, врачу необходимо обнаружить значительные нарушения агрегации. Они могут выражаться в отсутствии агрегации, ее чрезмерно низкой амплитуде, длительном латентном периоде. При повышении агрегационной активности тромбоцитов наступает спонтанная (без внесения индуктор) агрегация.
Несимметрично расположенные обширные кровоизлияния на коже говорят о нарушении свертывания, точечные же кровоизлияния в коже (петехии) — о нарушении образования тромбоцитов или изменения сосудов. Однако геморрагические диатезы, обусловленные нарушением образования тромбоцитов, также могут сопровождаться обширными кровоизлияниями.
– Симптом Румпель — Лееде— Кончаловского. При наложении на плечо широкого эластичного бинта в случае положительного результата через 5 минут вследствие застоя крови в локтевом сгибе или на предплечье выступают точечные кровоизлияния. Положительный симптом Румпель — Лееде—Кончаловского указывает на сосудистый фактор и на геморрагический диатез вследствие нарушений тромбоцитарной функции.
– Симптом щипка Юргенса (Orgens) (появление точечных кровоизлияний, если ущипнуть кожу под ключицей) при положительном результате пробы позволяет еще быстрее убедиться в склонности к кровотечениям и по своему значению равноценен симптому Румпель — Лееде—Кончаловского.
– Резистентность капилляров определяют наложением на кожу присасывающей банки: при положительном результате появляются точечные кровоизлияния.
– Определение длительности кровотечения по Дуке: при нанесении ранки на мочку уха иглой Франка с выдвинутым на 4 мм стилетом кровотечение в норме длится 1—2 минуты. Этот метод, однако, неточен, так как приходится учитывать ряд источников ошибок.
Удлинение времени кровотечения, как правило, связано с нарушением тромбоцитарной функции. Геморрагические диатезы иного происхождения, например при скорбуте, также протекают с удлинением времени кровотечения.
– Время свертывания удлинено при геморрагическом диатезе на почве нарушений свертывания. Умеренные замедления наблюдаются также при микседеме.
Техника определения времени свертывания по Бюркеру: на часовое стекло с каплей дистиллированной воды в нем, находящееся над водяной баней с температурой 25°, наносится из кончика пальца капля крови. Затем нитеобразно вытянутым концом стеклянной палочки проводят через эту смесь каждые 30 секунд. Появление первого фибринового волоконца указывает на начало свертывания, что в норме происходит через 3—5 минут. Через 6—8 минут свертывание заканчивается, что и составляет нормальное время свертывания.
P.S. Только вот я сама из города и у нас его в продаже не нашла, заказывала через интернет.
P.S. Я тоже из города ))