Норма трансферрина в кале

Где проводится: Тонус

Срок выполнения: 1-2 рабочих дня

Данное исследование направлено на выявление кровотечений из нижних отделов желудочно – кишечного тракта. Концентрация фекального гемоглобина и трансферрина, определяемая с помощью количественного иммунохимического метода FOB Gold (quantitative immunochemical Fecal Occult Blood Test FOB Gold) имеет большие преимущества перед широко распространенной ранее стандартной методикой качественного анализа кала на скрытую кровь. Известный тест «кал на скрытую кровь» с использованием менее специфичных химических тестов все-таки имеет ряд недостатков, таких как положительная реакция на гемоглобин и миоглобин животного происхождения, поступающий с пищей, а также на некоторые вещества. Это определяет необходимость соблюдения диеты перед сдачей анализа на гемоглобин в кале. Новый вариант данного теста с использование иммунохимических реакций является более чувствительным и строго специфичным к человеческому гемоглобину, что исключает необходимость диеты перед анализом на гемоглобин в кале. Помимо этих достоинств новый метод определения концентрации фекального гемоглобина и трансферрина (анализ на гемоглобин в кале, анализ на трансферрин в кале) является потенциальным онкомаркером, то есть может быть использован для диагностики предраковых поражений кишечника и ранней диагностики колоректального рака.

Определение концентрации фекального трансферрина, или анализ на трансферрин в кале, в комбинации с количественным определением гемоглобина в кале – анализ, имеющий сегодня самую высокую диагностическую чувствительность при обследовании пациентов с раком и предраковыми процессами толстого кишечника и прямой кишки.

Количественный анализ на трансферрин в кале иммунохимическим методом позволяет прогнозировать вероятность, стадию и локализацию предракового и ракового патологического процесса. Поэтому сегодня доказана целесообразность использования иммунохимического анализа на гемоглобин в кале, анализа на трансферрин в кале в качестве скрининга колоректального рака, ставшего довольно актуальной проблемой, учитывая возросшую частоту заболевания и бессимптомное течение рака.

Количественный анализ на трансферрин и гемоглобин в кале показан при диагностике заболеваний, связанных с воспалительными, аутоиммунными, язвенными процессами в слизистой оболочки нижний отделов желудочно – кишечного тракта.

Сдать анализ на гемоглобин и трансферрин в кале в качестве дополнительного исследования по показаниям предлагается при хроническом геморрое, глистных инвазиях, перенесенных бактериальных или вирусных кишечных инфекций.

Повышенное содержание трансферрина в кале при анализе свидетельствует о преимущественном поражении верхних отделов кишечника, а гемоглобина – нижних. При выявлении высоких значений обоих показателей наиболее вероятно обширное поражение кишечника.

Исследования на трансферрин и гемоглобин являются альтернативой колоноскопии. Анализ позволяет проводить отбор пациентов, нуждающихся в колоноскопии. В случае нормальных значений колоноскопия не проводится, решение о проведении исследования принимает врач. Высокие значения этих показателей являются основанием для проведения колоноскопии.

Чтобы сдать иммунохимический количественный анализ на гемоглобин в кале, трансферрин в кале, от пациента не требуется специфической подготовки, в том числе особой диеты. Если пациент принимает лекарственные средства, необходимо проконсультироваться с врачом о необходимости их отмены перед исследованием.

Сдать анализ на гемоглобин в кале, трансферрин в кале необходимо без применения клизм и слабительных средств. Стул для исследования должен быть получен без их применения.

Сдавать анализ на трансферрин в кале и фекальный гемоглобин не рекомендуется в течение 2 недель от момента проведения исследований и манипуляций, связанных с возможностью повреждения слизистой кишечника (ректоманоскопия, применение очистительных клизм и т.д.)

• Рак толстого кишечника и прямой кишки
• Мониторинг состояния кишечника после оперативного вмешательства
• Наследственный неполипозный колоректальный рак
• Семейный аденоматозный полипоз
• Полипы и подозрение на их наличие
• Хронические воспалительные заболевания кишечника, колиты
• Некротизирующий энтероколит, неспецифический язвенный колит
• Болезнь Крона и подозрение на нее
• Аутоиммунные заболевания
• Обследование членов семьи первой и второй степени родства, больных раком либо полипозом кишечника
• Скрининг для выявления колоректального рака лиц старше 40 лет (1 раз в год)

Высокие значения показателей гемоглобина и трансферрина в кале являются основанием для проведения колоноскопии.

Назначение

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления гемоглобина (скрытой крови) и/или трансферрина в кале.

Краткая информация

Анализ кала на скрытую кровь используют для выявления различных видов патологии нижних отделов желудочно-кишечного тракта, характеризующихся кровотечениями (полипы толстого кишечника, колоректальный рак, болезнь Крона, язвенный колит). Сосуды на поверхности колоректального полипа или злокачественного новообразования часто бывают хрупкими и легко повреждаются при прохождении каловых масс. При этом в фекалии выделяется небольшое количество крови, которое редко заметно на глаз.

Трансферрин – гликозилированный белок, осуществляющий транспорт ионов железа, – является производным компонентом крови и может попадать в желудочно-кишечный тракт и потом выводиться с калом в случае заболеваний, которые сопровождаются кровотечением из желудочно-кишечного тракта. Трансферрин стабилен в кале.

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» одновременно определяет гемоглобин и трасферрин в образцах кала, позволяя выявлять кровотечения из верхних и нижних отделов желудочно-кишечного тракта.

Принцип метода

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце гемоглобина и/или трансферрина они вступают в реакцию с нанесенными на стартовую зону тест-полоски специфическими моноклональными антителами против гемоглобина и трансферрина, меченными окрашенными частицами, и продолжают движение с током жидкости. В аналитических зонах тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами против гемоглобина и трансферрина, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенных иммунных комплексов.

В контрольной зоне тест-полоски специфические окрашенные иммунные комплексы образуются независимо от наличия в тестируемом биологическом материале гемоглобина и/или трансферрина.

В том случае, если в анализируемом образце присутствует гемоглобин и трансферрин, на тест-полоске образуются три параллельные окрашенные линии (красная и синяя аналитические, обозначенные буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа по обоим белкам. В случае отсутствия в анализируемом образце гемоглобина и трансферрина на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа по обоим белкам.

Состав

Один комплект тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» включает:

• тест-полоски иммунохроматографические «РЭД скрытая кровь-трансферрин» в кассетах из пластика белого цвета – 5, 10 или 20 шт.;
• пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
• этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
• инструкцию по применению теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» – 1 шт.

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем.

Комплект тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» упакован в картонную коробку.

Необходимые оборудование и материалы, не входящие в состав набора

• контейнеры для сбора образцов кала;
• одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
• часы или таймер.

Аналитические характеристики

• Чувствительность теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» составляет >99% по гемоглобину и >99% по трансферрину.
• Специфичность теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» составляет >99% по гемоглобину и >99% по трансферрину.
• Время проведения анализа – 10 мин.

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» специфичен по отношению к гемоглобину и трансферрину человека и не дает перекрестных реакций с гемоглобином, миоглобином и трансферрином животного происхождения, поступающими с пищей.

Каждый тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен для одного определения наличия гемоглобина и/или трансферрина в кале человека.

Меры предосторожности

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен только для in vitro диагностики.

Все компоненты теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» в используемых концентрациях являются нетоксичными.

Не следует использовать тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» после истечения срока годности.

При проведении определения следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. исследуемые образцы биологического материала следует рассматривать как потенциально инфицированные.

Использованные тесты и остатки биологического материала должны быть помещены в специальный контейнер для санитарных отходов.

Анализируемые образцы

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.

Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер.

Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С и ниже.

Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.

Подготовка образцов

1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество (10-20 мг) анализируемого образца кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, пипеткой отобрать 10-20 мкл.

2. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).

3. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).

Проведение анализа

Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С).

4. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.

5. Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полоской и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.

6. 4 капли (примерно 100 мкл) жидкого образца внести в круглое окошко кассеты, обозначенное буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе с жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

7. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.

Интерпретация результатов

Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала гемоглобина и трансферрина (рис. 3-1).

Выявление в тестовом окошке кассеты трех параллельных окрашенных линий (зеленой, красной и синей) свидетельствует о положительном результате анализа по обоим белкам, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала гемоглобина и трансферрина (рис. 3-2). Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (зеленой и красной) свидетельствует о положительном результате анализа по трансферрину, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала трансферрина и отсутствие гемоглобина (рис. 3-3). Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (зеленой и синей) свидетельствует о положительном результате анализа по гемоглобину, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала гемоглобина и отсутствие трансферрина (рис. 3-4). Интенсивность окраски красной и синей аналитических линии может меняться в зависимости от концентраций, соответственно, трансферрина и гемоглобина в образце.

В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только красная и/или синяя аналитические линии, результат анализа признается недействительным (рис. 3-5). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

Образцы кала, забранные у пациентов с кровоточащим геммороем, запорами, а также в период менструации, могут показать ложноположительные результаты.

Результаты, полученные с использованием теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.

Условия хранения и эксплуатации

Тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» должны храниться при температуре от 2 до 25°С в упаковке предприятия-изготовителя в сухом месте в течение всего срока годности. Замораживание тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» не допускается.

Срок годности тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» – 24 мес. с даты изготовления.

После вскрытия упаковки тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» должны быть использованы в течение 2 ч при хранении в сухом месте при комнатной температуре.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение Инструкции по применению теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

Дата публикации: 09 сентября 2014 .

Заведующая клинико-диагностической
лабораторией Пищик В.В.

Экспресс-анализ определения скрытой крови, трансферрина, кальпротектина, лактоферрина в кале – неинвазивный тест для диагностики желудочно-кишечных кровотечений и воспалительных заболеваний.

Кровь в кале – признак повреждения слизистой и сосудов желудочно-кишечного тракта. Такое явление может быть симптомом различных заболеваний, а именно: криптита, полипов прямой кишки, анальных трещин, проктита, рака прямой кишки, рака желудка и прочих отделов кишечника, язвы желудка или двенадцатиперстной кишки, болезни Крона, цирроза печени, варикоза пищевого тракта. Помимо этих заболеваний причинами кровяных вкраплений в кале могут быть: дизентерия, эндометриоз толстой кишки, побочные действия медикаментов, аномалии сосудов кишечника.

Маркерами желудочно-кишечных кровотечений являются гемоглобин и трансферрин.

Гемоглобин – железосодержащий белок-переносчик кислорода в красных кровяных клетках всех позвоночных, который может выделяться в желудочно-кишечный тракт (ЖКТ) и затем выделяться с калом при желудочно-кишечных заболеваниях. Гемоглобин не стабилен в кале, но иммунохимические тесты обнаружения гемоглобина являются очень специфическими анализами для выявления кровотечения из нижних отделов кишечника потому, что кровь из нижних отделов менее поддается разрушению во время транзита по ЖКТ.

Трансферрин – производный компонент крови, который может выделяться в ЖКТ и затем выделяться с калом при желудочно-кишечных заболеваниях. Трансферрин устойчив в кале и, следовательно, является хорошим маркером для определения наличия кровотечения в нижних и верхних отделах кишечника. Определение фекального трансферрина, более стабильного аналита, предоставляет собой альтернативный метод диагностики заболевания в верхних отделах кишечника.

Сочетание двух маркеров желудочно-кишечных кровотечений повышает диагностическую ценность теста и дает возможность предположения места локализации кровотечения.

Кальпротектин и лактоферрин являются показателями воспалительных заболеваний кишечника (ВЗК).

Кальпротектин – это белок, вырабатывающийся в лейкоцитах, его концентрация в кале прямо пропорцианально числу лейкоцитов (нейтрофилов), попавших в кишечник. Высокий уровень кальпротектина надежно отражает активность и распространенность воспаления в слизистой оболочке кишечника, а также является предиктором близкого обострения у пациентов с болезнью Крона, язвенным колитом. Кальпротектин высоко стабилен в кале в течение нескольких дней. Тест позволяет проводить дифференциальный диагноз между органическими воспалительными заболеваниями кишечника (ВЗК) и функциональным синдромом раздраженного кишечника (СРК). При CРК кальпротектин в пределах нормы.

Лактоферрин – железосвязывающий белок, является естественным антимикробным, антигрибковым и антивирусным белком, обладает антиоксидантным и иммуномодулирующими свойствами, поддерживает микробаланс в гастроинтестинальной системе. При болезни Крона концентрация лактоферрина в кале возрастает в десятки и даже сотни раз и поэтому является очень чувствительным и специфичным маркером данной патологии.

Определение комбинации перечисленных маркеров может быть очень информативным для:

– дифференциальной диагностики функциональных и воспалительных заболеваний кишечника;

– надежной оценки активности воспалительного процесса в кишечнике неинвазивным методом;

– мониторинга течения и эффективности терапии болезни Крона и язвенного колита;

– быстрого получения первых результатов без дорогостоящих радиологического и/или эндоскопического исследований.