Латекс тест что это

Все материалы публикуются под авторством, либо редакцией профессиональных медиков ( об авторах ), но не являются предписанием к лечению. Обращайтесь к специалистам!

При использовании материалов ссылка или указание названия источника обязательны.

Автор: З. Нелли Владимировна, врач лабораторной диагностики, квалификация по иммунодиагностике

Такое биохимическое исследование, как определение ревматоидного фактора в сыворотке крови, многим пациентам, особенно, имеющим проблемы с суставами, хорошо известно, ведь уже само название анализа ассоциируется с конкретным заболеванием – ревматоидным артритом (РА). Действительно, ревматоидный фактор (РФ) относится к основным лабораторным тестам, определяющим эту болезнь, но, помимо ревматоидного артрита, с помощью ревмофактора удается выявить и другие патологические состояния, в частности, острые воспалительные заболевания в организме и некоторые системные болезни.

По своей природе ревматоидный фактор представляет собой антитела (преимущественно класса М – до 90%, остальные 10% – иммуноглобулины классов А, Е, G) против других антител (класса G) и Fc-фрагментам.

Норма ревматоидного фактора для всех одна: у женщин, мужчин и детей он отсутствует (качественный тест) или не превышает 14 МЕ/мл (количественный анализ), если в организме в этом плане все благополучно. Однако бывают случаи, когда РФ не обнаруживается, а симптомы очевидны (основная причина повышения – ревматоидный артрит), или он есть, а человек здоров. Об этом можно прочитать ниже.

Суть и виды анализа

Суть анализа состоит в выявлении аутоантител, в большинстве случаев принадлежащих иммуноглобулинам класса М (IgM). Антитела (IgM до 90%) при определенных патологических состояниях под влиянием инфекционного агента меняют свои характеристики и начинают выступать в качестве аутоантигена, способного взаимодействовать с другими собственными антителами – иммуноглобулинами класса G (IgG).

В настоящее время для определения ревматоидного фактора, в основном, применяется такие виды лабораторных методик:

• Латекс-тест с аггрегированными на латексной поверхности человеческими иммуноглобулинами класса G, агглютинирующими в присутствии ревмофактора – это качественный (не количественный) анализ), определяющий наличие или отсутствие РФ, но не указывающий его концентрацию. Латекс-тест очень быстро проводится, недорогой, не требует специального оборудования и особых трудозатрат, однако он применяется преимущественно для скрининговых исследований. Экспресс-анализ нередко дает ложноположительные ответы, поэтому не может быть основанием для установления окончательного диагноза. В норме ревмофактор при таком исследовании – отрицательный;
• Применяется все реже, но еще полностью не утратил своего практического значения классический анализ Ваалера-Розе (пассивная агглютинация с овечьими эритроцитами, обработанными антиэритроцитарной кроличьей сывороткой). Данное исследование все-таки более специфическое, нежели латекс-тест;
• Неплохо согласуется с латекс-тестом, но по точности и надежности превосходит его – нефелометрическое и турбидиметрическое определение ревматоидного фактора. Метод стандартизирован, концентрация комплексов «антиген-антитело» (АГ-АТ) измеряется в lU/ml (МЕ/мл), то есть, это уже количественный анализ, который говорит не только о присутствии ревматоидного фактора, но и о его количестве. Повышенным ревматологи рассматривают результат, если значения концентрации переходят границу 20 МЕ/мл, однако приблизительно у 2-3% здоровых людей и до 15% людей пожилого возраста (старше 65 лет) данный показатель также иногда дает повышенные значения. У лиц, страдающих ревматоидным артритом, особенно с быстро развивающейся и тяжелой формой, он может быть довольно высоким (титры РФ превышают значения 40 lU/ml, в иных случаях – весьма существенно).
• Метод ИФА (иммуноферментный анализ), который способен определить, помимо IgM, не улавливаемые другими методами аутоантитела классов А, Е, G, составляющие 10% специфического белка, которого мы называем ревмофактором. Данный тест получил широкое распространение, внедрен практически повсеместно (разве что не в сельских амбулаториях), поскольку признан наиболее точным и надежным. Замечено, что сопутствие васкулитов при ревматоидном артрите дает повышенную концентрацию иммуноглобулинов класса G, а появление аутоантител класса А характерно для быстропрогрессирующего и тяжелого течения заболевания (РА).

До недавних пор для установления диагноза (РА) за основу брались вышеперечисленные лабораторные тесты. В настоящее время диагностическое мероприятия, помимо обязательных иммунологических исследований, пополнились другими лабораторными методами, к которым относятся: А-ССР (антитела к циклическому цитруллиновому пептиду – anti CCP), острофазные маркеры – СРБ (С-реактивный белок), АСЛ-О. Они дают возможность быстрее и с большей точностью дифференцировать ревматоидный артрит от другой патологии, похожей симптоматически, или от болезней, при которых клиническая картина отлична от РА, но РФ также имеет склонность к повышению.

Высокий уровень РФ и низкие значения фактора

Чаще всего ревматоидный фактор применяют для диагностики ревматоидного артрита, его повышение наблюдается приблизительно у 80% пациентов, имеющих самую распространенную форму заболевания (синовит).

Следует также отметить, что, обладая высокой чувствительностью, ревматоидный фактор не показывает настолько высокую специфичность (каждый 4-ый результат оказывается ложноположительным), ведь его природа до конца не изучена, однако известно, что ауантитела активно вырабатываются при многих хронически протекающих воспалительных процессах.

Кроме этого, РФ может не определяться при наличии признаков заболевания при ревматоидном артрите в начале развития патологического процесса у 20-25% пациентов, поэтому однократный отрицательный результат не может обнадеживать, если симптомы заболевания имеют место. В подозрительных случаях анализ следует повторить через полгода и год (дать время обновиться пулу плазматических клеток, которые продуцируют аутоантитела).

Нецелесообразно надеяться на данный анализ и для контроля над течением процесса и эффективностью терапии – лекарственные средства, получаемые больным, могут влиять на результаты исследований, которые перестают отражать реальную картину и тем самым вводят в заблуждение пациента (он начинает преждевременно радоваться излечению, приписывая заслуги каким-нибудь народным средствам).

Ревматоидный фактор у детей не предопределяет диагноз РА

Если у взрослых (у женщины, у мужчины – неважно) ревматоидный фактор довольно тесно ассоциируется с ревматоидным артритом, то у детей складывается несколько иная ситуация. Ювенильный РА, формирующийся до 16 лет, даже при бурном развитии воспалительного процесса дает повышение титров РФ (в основном, за счет IgM) только в 20 % случаев – при дебюте болезни у детей до 5 лет. Начало развития процесса у ребят до 10 лет проявляется повышением данного показателя всего лишь у 10 % заболевших.

Между тем, часто и длительно болеющие дети имеют РФ повышенным даже без явных признаков какой-либо болезни. Это говорит о том, что аутоантитела (IgM) могут вырабатываться у них из-за длительной иммуностимуляции (хронические инфекции, недавно перенесенные вирусные заболевания и воспалительные процессы, глистные инвазии), и причина кроется вовсе не в развитии ревматоидного артрита.

Учитывая такие характеристики ревматоидного фактора, педиатры какой-то особой диагностической ценности этому лабораторному исследованию не придают.

Другие причины повышенных значений ревмофактора

Причиной повышения в крови концентрации ревматоидного фактора, помимо классического варианта ревматоидного артрита, могут быть многие другие патологические состояния:

1. Острые воспалительные заболевания (грипп, сифилис, инфекционный мононуклеоз, бактериальный эндокардит, туберкулез, вирусный гепатит);
2. Широкий круг хронический воспалительных процессов, локализованных в печени, легких, костно-мышечном аппарате, почках;
3. Синдром Шегрена – аутоиммунная болезнь, поражающая соединительную ткань и втягивающая в процесс железы внешней секреции (слезные, слюнные – в первую очередь). Для синдрома Шегрена характерны и соответствующие симптомы: сухость слизистых глаз, полости рта, наружных половых органов, страдания органов дыхания, сердечно-сосудистой системы, почек;
4. Felty-синдром, представляющий собой особую форму РА, характеризуемый острым началом со снижением в крови количества белых кровяных клеток – лейкоцитов (лейкопения);
5. Still-синдром (синдром Стилла) – форма ювенильного (детского) ревматоидного артрита, симптоматика которого совпадает с таковой при Felty-синдроме, но отличается показателями общего анализа крови – количество лейкоцитов повышено (лейкоцитоз);
6. Склеродермия;
7. Гиперглобулинемии различного происхождения;
8. В-клеточные лимфопролиферативные заболевания (миелома, макроглобулинемия Вальденстрема, болезни тяжелых цепей);
9. СКВ (системная красная волчанка);
10. Саркоидоз;
11. Дерматомиозит;
12. Оперативные вмешательства;
13. Онкологические процессы.

Очевидно, что список состояний, способных стать причиной повышения концентрации ревмофактора, не ограничивается одним лишь ревматоидным артритом.

Кроме этого, следует иметь в виду, что данный показатель естественным образом повышается у людей преклонного возраста (60-70 лет), а также при применении некоторых лекарственных средств (метилдопа, противосудорожные и противозачаточные препараты), поэтому считать его специфическим и особо значимым для диагностики нецелесообразно.

Впрочем, лечащий доктор разберется, а наша статья предназначена людям, пытающимся самостоятельно интерпретировать результаты биохимических исследований. Ведь бывает, что услышав информацию о высоких цифрах какого-то анализа, особо мнительные граждане впадают в панику или (еще хуже) начинают проявлять самодеятельность и лечиться разными сомнительными средствами.

Видео: ревматоидный артрит (РА), программа “Жить здорово!”

Регистрационное удостоверение № ФСЗ 2010/06205.

АСЛО прямой латексный тест (ASO Direct Latex)

Кат. № L-99110

Экспресс-тест для полуколичественного определения антистрептолизина О в сыворотке крови. Чувствительность >200 МЕ/мл. Контроли положительный и отрицательный, подложка, мешалки. Время анализа не более 3 мин.

РФ прямой латексный тест (RF Direct Latex)

Кат. № L-99080

Экспресс-тест для полуколичественного определения ревматоидного фактора в сыворотке крови. Чувствительность >8 МЕ/мл. Контроли положительный и отрицательный, подложка, мешалки. Время анализа не более 3 мин.

СРБ прямой латексный тест (CRP Direct Latex)

Кат. № L-99050

Экспресс-тест для полуколичественного определения С-реактивного белка в сыворотке крови. Чувствительность >6 мкг/мл. Контроли положительный и отрицательный, подложка, мешалки. Время анализа не более 3 мин.

Описание

СРБ латекс-тест Комплект №1 250 определений (Набор реагентов для определения С-реактивного белка в реакции агглютинации латекса (качественный и количественный анализ) (12.01)

Инструкция по применению набора реагентов «СРБ ЛАТЕКС-ТЕСТ»

Набор реагентов для определения С-реактивного белка в реакции агглютинации латекса

Регистрационное удостоверение № ФСР 2011/12205 от 03.11.11 г.

Для выявления и определения содержания СРБ в сыворотке крови человека методом реакции агглютинации латекса (РАЛ). СРБ является белком острой фазы, концентрация которого возрастает при воспалительных процессах, повреждениях тканей, бактериемии и вирусных инфекциях. При воспалительных процессах, связанных с бактериальными инфекциями, концентрация СРБ может повышаться до 300 мг/л за 12-24 часа.

1. ХАРАКТЕРИСТИКА НАБОРА

2.1. Принцип действия

При наличии в исследуемой пробе СРБ он взаимодействует с соответствующими антителами, находящимися на поверхности латексных частиц. Результатом взаимодействия является агглютинация латекса с образованием мелких или крупных зерен, различимых визуально.

2.2. Состав набора

СРБ-латексный реагент – суспензия монодисперсного полистирольного латекса с иммобилизованным на поверхности его частиц иммуноглобулином (IgG) к СРБ человека; суспензия белого цвета, при хранении разделяется на осадок белого цвета, легко разбивающийся при встряхивании, и бесцветную прозрачную или слегка опалесцирующую надосадочную жидкость. Чувствительность СРБ-латекса откалибрована относительно референсного материала CRM 470/RPPHS.

Физиологический раствор (ФР) – 0,9 % раствор натрия хлорида; содержит консервант — азид натрия в конечной концентрации 0,1 %; прозрачная бесцветная жидкость

Положительная контрольная сыворотка (К + ) — жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течение 1 ч, содержащая СРБ в концентрации не менее 12 мг/л, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; консервант – натрия азид, в конечной концентрации 0,1 %. Прозрачная бесцветная или от желтоватого до красно-коричневатого цвета жидкость.

Отрицательная контрольная сыворотка (К – ) – жидкая сыворотка крови человека, инактивированная прогреванием при 56° С в течение 1 ч, содержащая СРБ в концентрации менее 6 мг/л, дающая отрицательную реакцию на HBsAg и не содержащая антител к ВИЧ-1, ВИЧ-2 и ВГС; консервант – натрия азид, в конечной концентрации 0,1 %. Прозрачная или желтоватого цвета жидкость.

1. АНАЛИТИЧЕСКИЕ И ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ НАБОРА

Набор рассчитан на проведение 250 исследований, включая контрольные образцы.

Набор позволяет обнаруживать СРБ в неразведенной сыворотке крови человека в концентрации от 6 мг/л и выше.

1. МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ

Набор биологически безопасен, но при работе с исследуемыми образцами сыворотки необходимо обращаться с ними как с потенциально инфицированными материалами.

1. ОБОРУДОВАНИЕ И МАТЕРИАЛЫ

— Шейкер орбитальный (любой марки с амплитудой колебаний 10-20 мм).

— Градуированные пипетки 2 класса точности или дозаторы пипеточные.

— Микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 20 мкл).

-Палочки стеклянные или пластиковые.

— Часы или таймер.

1. ИССЛЕДУЕМЫЕ ОБРАЗЦЫ

Используется свежеполученная сыворотка крови. Использование в качестве образцов плазмы крови не допускается. Забор крови должен быть произведен согласно стандартной процедуре. Допускается хранение образцов 7 дней при 2-8 ˚С или 3 месяца при температуре минус 20 ˚С. Не подвергать образцы повторному замораживанию и оттаиванию.

Исследуемая сыворотка должна быть прозрачной и не содержать взвешенных частиц.

Образцы, содержащие осадок, перед анализом должны быть отцентрифугированы в течении 10-15 мин при 2,5-3,0 тыс. об/мин

Не использовать гемолизированные или загрязненные образцы.

1. ПРОВЕДЕНИЕ АНАЛИЗА

7.1. Подготовка реагентов и материалов

Выдержать все компоненты набора и исследуемые образцы не менее 20 мин при комнатной температуре. Легким встряхиванием флакона тщательно перемешать СРБ-латексный реагент. Контрольные сыворотки и физиологический раствор готовы к применению.

Подготовить дополнительное оборудование:

• пластину стеклянную или карточку для постановки реакции;
• микропипетки автоматические или пипетки-мешалки (на 10-50 мкл);
• палочки стеклянные или пластиковые;
• часы или таймер.

7.2. Качественное определение

Нанести на первую ячейку карточки 20 мкл К + , на соседнюю ячейку карточки — 20 мкл К – . На свободные ячейки карточки нанести по 20 мкл исследуемых образцов.

Тщательно перемешанный СРБ-латексный реагент добавить по 20 мкл в каждую ячейку с образцом. Плоским концом пипетки-мешалки (стеклянной палочкой) осторожно перемешать каждую каплю, распределив реакционную смесь по всей площади ячейки. Для каждой капли использовать новую пипетку-мешалку (стеклянную палочку).

Покачивать карточку вручную или на шейкере в течение 2 мин., после чего сразу произвести учет результатов реакции.

7.3. Полуколичественное определение

Непосредственно на карточке для постановки реакции приготовить следующие разведения исследуемого образца в физиологическом растворе 9 г/л: 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, 1:32 и 1:64. При необходимости число разведений можно увеличить.

Легким встряхиванием флакона перемешать СРБ-латексный реагент и добавить по 20 мкл в каждую ячейку с разведением исследуемого образца, после чего перемешать каждую каплю, как указано выше для качественного определения.

Покачивать карточку вручную или на шейкере в течение 2 мин., после чего сразу произвести учет результатов реакции.

1. РЕГИСТРАЦИЯ И УЧЕТ РЕЗУЛЬТАТОВ

Учет результатов проводят визуально на темном фоне после внесения реагента в исследуемый образец не позднее 2 мин., при более позднем учете могут быть получены ложноположительные результаты.

Положительной РАЛ считается наличие агглютинации латекса (любое появление зернистости или различимых частиц).

Отрицательной РАЛ считается отсутствие агглютинации (жидкость в ячейке остается мутной и однородной).

Результаты реакции с исследуемыми образцами учитываются только при положительной реакции с К + и отрицательной с К – .

Положительная реакция свидетельствует о наличии СРБ в исследуемой сыворотке в концентрации более 6 мг/л. Все образцы давшую положительную реакцию, подлежат дополнительному количественному исследованию.

Отрицательная реакция свидетельствует, что концентрация СРБ составляет менее 6 мг/л.

По результатам титрования образца определить величину, обратную титру СРБ.

Концентрацию СРБ в образце рассчитать по формуле:

концентрация СРБ (мг/л) = 6 мг/л×(величина, обратная титру образца)

где 6 мг/л – минимальная концентрация СРБ, определяемая в РАЛ;

Титр исследуемого образца с положительной РАЛ — 1:32;

концентрация СРБ =6 мг/л x32 = 192 мг/л

Если концентрация СРБ в пробе более1600 мг/л может наблюдаться эффект прозоны. Для исключения этого сыворотку рекомендуется разводить.

Клинический диагноз не должен основываться на заключении результата одного теста и должен объединять клинические и лабораторные данные исследования.

1. ФОРМА ВЫПУСКА

Набор выпускается в комплектации:

Наименование компонента СРБ-латексный

реагент

1. СРОК ГОДНОСТИ. УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ, ТРАНСПОРТИРОВКИ И ЭКСПЛУАТАЦИИ НАБОРА

Срок годности набора – 2 года.

Набор должен храниться в упаковке предприятия-изготовителя при температуре от 2 до 8 о С в течение всего срока годности. Замораживание не допускается.

Набор транспортируют при температуре от 2 до 8 о С; допускается транспортирование при температуре от 9 до 25 о С в течение 10 сут. Замораживание не допускается.

Неиспользованные реагенты хранят в герметично укупоренной таре при температуре от 2 до 8 о С до истечения срока годности набора.

1. УСЛОВИЯ ОТПУСКА

Для учреждений здравоохранения.

По вопросам, касающимся качества набора «СРБ латекс-тест», следует обращаться по адресу 142530 Московская обл., г. Электрогорск, ул. Буденного, д. 1, ЗАО «ЭКОлаб»; тел. (49643) 3-23-11, факс (49643) 3-30-93 – отдел сбыта, (49643) 3-37-30 – ОБТК.

Взамен инструкции, утвержденной 22.12.2006 г.