Группа крови системы mnss

Выявление антигенов системы АВ0(Н) производится тремя основными методами: количественный метод абсорбции агглютининов прост, позволяет избежать влияния различных загрязнений предмета-носителя, но недостаточно чувствителен; серологические методы абсорбции-элюции и смешанной агглютинации весьма чувствительны и в основном применяются для установления групповой принадлежности крови в следах малого размера. Эти методы основаны на способности антител α и β абсорбироваться соответствующими антигенами А и В. В качестве недостатка методов абсорбции-элюции и смешанной агглютинации следует отметить необходимость использования при них диагностических сывороток высокой активности, а также тщательного соблюдения всех этапов исследования во избежание появления неспецифических реакций, могущих привести к экспертным ошибкам.

При использовании метода абсорбции в количественной модификации материал пятна приводят во взаимодействие с сыворотками α и β, взятыми в заранее подобранном титре. При наличии в пятнах антигена соответствующие антитела сыворотки соединяются с ним и сыворотка либо теряет способность реагировать с соответствующими эритроцитами (например, сыворотка а не агглютинирует эритроциты группы А), либо значительно понизит свой титр. После абсорбции определяют титр сывороток и на основании изменения титра судят о присутствии того или другого антитела или их обоих в пятне крови. Метод требует сравнительно большого количества исследуемой крови.

Реакции абсорбции-элюции и смешанной агглютинации позволяют последовательно в одном и том же материале исследовать антигены нескольких эритроцитарных систем. На первом этапе они проводятся одинаково. Берут две ниточки длиной по 0,5— 0,6 см и обрабатывают их метиловым спиртом для фиксирования крови на материале исследования. Одну ниточку заливают сывороткой α, а вторую — сывороткой β (рис. 95).

Рис. 95. Схема реакции абсорбции-элюции.

При присутствии в исследуемом материале соответствующего сыворотке антигена (например, α и А) происходит абсорбция этого антитела и образуется комплекс антиген — антитело. Этот комплекс при последующем отмывании ниточек от свободных антител не удаляется. Если затем производят реакцию абсорбции-элюции, то элюцию (разъединение комплекса антиген — антитело) производят путем нагревания в изотоническом растворе хлорида натрия. Антитела при этом поступают в окружающую среду. Путем добавления к элюату эритроцитов группы А и В выявляют элюированное антитело (агглютинация соответствующих эритроцитов). На основании этого судят о присутствии в исследуемой крови антигенов. Например, исследуемая кровь содержит антиген А. В этом случае сыворотка а свяжется с антигеном А и при элюции выйдет в элюат. Присутствие антител а в элюате будет установлено, так как они вызовут агглютинацию стандартных эритроцитов А.

При проведении реакции смешанной агглютинации к ниточкам после промывания добавляют стандартные эритроциты группы А и В (к ниточке, обработанной сывороткой а, добавляют эритроциты группы А, а к ниточке, обработанной сывороткой 6, — эритроциты группы В).

При наличии в пятне крови антигена А сыворотка вступит в связь с этим антигеном и после добавления эритроцитов группы А свободные валентности антител а фиксируют эритроциты А. Аналогичная картина будет наблюдаться с эритроцитами В при наличии в пятнах крови антигена В. При микроскопировании наблюдаются скопления эритроцитов в виде бус или муфт вдоль волокон исследуемой ниточки. При отрицательном результате исследования эритроциты распределяются в препарате равномерно.

Система MNSs имеет девять групп: MNSs, MNs, Ns, Mss, Ms, MS, NSs, MNS и Ns. Вследствие благоприятной частоты распределения среди населения система является весьма информативной для судебно-медицинской групповой индентификации. Установление групповых факторов системы MNSs в пятнах крови сложно в связи с меньшей устойчивостью и сохраняемостью антигенов М, N, S, s в пятнах крови по сравнению с групповыми антигенами системы АВ0(Н), а также с различной антигенной силой выраженности ее групповых факторов М и N. В настоящее время для выявления антигенов системы MNSs в следах крови довольно успешно применяются методы абсорбции-элюции и смешанной агглютинации с использованием высокоактивных диагностических сывороток.

Кровь — жидкая подвижная соединительная ткань, значение которой для организма очень велико. Её переливание может спасти жизнь человеку, но индивидуальные характеристики жидкости разных людей различаются, и неподходящий состав может вызвать анемию, нарушение всех функций почек, шок или летальный исход. Поэтому очень важно знать всё о группах крови.

Определение термина

Кровь состоит из плазмы и взвешенных в ней клеток лейкоцитов, тромбоцитов и эритроцитов. Последние также называются красными кровяными тельцами. Они разносят кислород по телу животного или человека, поэтому основной компонент в их составе — дыхательный гемоглобин. Также у эритроцита есть липопротеидная плазматическая мембрана, на поверхности которой находятся агглютиногены — антигены, вызывающие в организме образование изоантител. Антигенные характеристики красных кровяных телец и подразумеваются под группой крови. Определить их можно, идентифицировав специфические группы белков и углеводов в мембране эритроцита.

Важные классификации

Самыми важными классификациями группы крови являются системы эритроцитарных антигенов АВ0 и резус. Помимо них, есть ещё 34 системы, которые имеют меньшее значение в прикладной медицине, но являются довольно важными, поскольку влияют на последствия переливания крови для пациента и в некоторых случаях пренебрежение ими ведёт к летальному исходу. Среди таких выделяют систему Келл, Кид, Даффи, Лангерайс и Джуниор, Велл-отрицательную группу и Бомбей.

Четыре группы АВ0

Система была открыта в 1900 году врачом Карлом Ландштейнером. Её гены имеют различные формы, а их локус расположен на длинном плече девятой хромосомы. Продуктами некоторых генов являются ферменты, переносящие сахара и присоединяющие их к органическим молекулам. В результате этого определённые компоненты мембран эритроцитов преобразуются в агглютиногены А или В.

Если на поверхности эритроцитов содержатся антигены А, в плазме могут находиться антитела анти-В. Соответственно, если есть антигены В, там могут быть только анти-А. Если пациенту, в плазме которого содержатся антитела анти-А, перелить кровь с антигеном А, произойдёт агглютининация эритроцитов, то есть они склеятся и выпадут в осадок. Определяющие группу крови комбинации белков могут быть следующими:

• I группа — на эритроцитах нет антигенов А и В, в крови присутствуют антитела анти-А и анти-В.
• II — на красных кровяных клетках антиген А, в плазме анти-В.
• III — на эритроцитах антиген В, в крови анти-А.
• IV — на клетках антигены А и В, в плазме нет антител.

Поскольку при I группе на эритроцитах крови нет антигенов, при необходимости её эритромассу можно перелить любому человеку, независимо от того, какие антитела находятся в его плазме, и есть ли они вообще. Соответственно, люди с IV группой могут стать универсальными донорами плазмы.

Группа крови каждого человека зависит от его родителей следующим образом:

• если у одного из них она была I, то ребёнок никогда не будет иметь IV группу, а если у обоих, то малыш может родиться только с I;
• когда у обоих родителей II или III группа, ребёнок с высокой степенью вероятности рождается с I, а если у одного II, а у другого III, то дети могут иметь любую из четырёх групп;
• если хотя бы у одного из пары IV группа, ребёнок не будет обладать I, хотя редкие исключения всё же встречаются.

Определение групповой принадлежности крови имеет важное практическое значение. Без этих знаний невозможно провести трансфузию биологической и заменяющей её жидкости и трансплантацию органов, в клетках которых также могут находиться антигены А и В.

Исследования могут помочь установить биологическое родство родителей с детьми (это проще, чем ДНК-тест, хотя и менее точно) и решить другие задачи судебно-медицинской экспертизы, а также генеалогии.

Непосредственное определение основывается на взаимодействии эритроцитов со стандартными группоспецифическими сыворотками, содержащими определённые титры анти-А и анти-В (обычно в 10 раз больше, чем концентрация красных кровяных клеток). Анализируемая кровь пациента смешивается на белой пластинке с солевым раствором моноклональных антител. Группа определяется уже через 3 минуты по следующим результатам:

• взаимодействия не произошло — I;
• эритроциты прореагировали только с анти-А — II;
• реакция произошла только с анти-В — III;
• красные кровяные тельца связались с обоими типами антител — IV (в этом случае для более высокой достоверности добавляется капля изотонического раствора).

Такое определение не всегда даёт верный результат, поскольку некоторые относительно редкие формы генов могут не определяться со стандартным титром. В таком случае берётся более высокая концентрация антител.

Но даже точного определения не всегда достаточно для того, чтобы убедиться в полной совместимости с кровью той же группы. Так происходит из-за того, что в плазме могут присутствовать нетипичные антитела. Исключить это можно, проведя тест на индивидуальную совместимость. Для этого кровь пациента смешивается с донорской на белой пластинке при комнатной или чуть меньшей температуре. Если через 5 минут эритроциты склеятся между собой, фиксируется несовместимость, такую кровь переливать нельзя, несмотря на то, что она имеет одноимённую группу.

Положительный и отрицательный резус-фактор

Название системе дано в честь вида макак-резус, так как именно их кровь использовалась при исследованиях. В её обнаружение так же, как и в АВ0, внёс свой вклад Карл Ландштейнер, а также Александр Винер. Резусом называют определённый белок, состоящий из нескольких десятков антигенов, на поверхности эритроцитов. Он есть у 85% представителей европеоидной расы и у 93% негроидной, их называют резус-положительными. Соответственно те, кто не имеет такого белка на поверхности красных кровяных клеток, резус-отрицательные.

Показатель имеет большое значение при формировании плода в утробе матери. Конфликта не возникает, если оба будущих родителя имеют белок или у обоих его нет. Но когда мать резус-отрицательная, а отец резус-положительный, будущий ребёнок наследует доминантный признак отца, и это приводит к иммунному ответу со стороны матери.

Если это первая беременность, то во время внутриутробного развития антитела не вырабатываются, так как обычно кровяные жидкости плода и матери не смешиваются. В результате ребёнок рождается здоровым, однако во время родов резус попадает в кровь матери, и в её организме образуются антитела. В редких случаях этот процесс происходит после аборта или выкидыша.

При следующей беременности выработавшиеся антитела проникают через плаценту и атакуют эритроциты будущего ребёнка, которые начинают разрушаться. При этом УЗИ плода показывает увеличение некоторых органов, поскольку его организм пытается компенсировать разрушенные кровяные клетки, усиленно вырабатывая их не только в костном мозге, но также в печени и селезёнке. Особо тяжёлые случаи заканчиваются мертворождением, а при нормальных родах у младенца может сформироваться гемолитическая желтуха — состояние, при котором эритроциты продолжают массово распадаться.

Избежать этих патологий можно, внутримышечно вводя резус-отрицательной матери специальные антиантитела. В разных случаях их вводят во время планирования беременности, в первый или последний её триместр либо в течение трёх суток после родов.

Другие системы

АВ0 и резус-фактор — основные системы при изучении крови, но не единственные. Кроме них, существуют ещё десятки классификаций, и их количество постоянно растёт. Наиболее значимы из них следующие:

• Келл. На основании комбинации двух активных антигенов K и k в этой системе выделяются три группы крови: K — K, K — k и k — k. Они важны в трансфузиологии и при беременности, поскольку против этих антигенов могут вырабатываться антитела, что влечёт за собой осложнения.
• Кидд. Три группы формируется на основании комбинации двух антигенов. Пренебрежение ими при переливании крови или беременности также может повлечь за собой гемотрансфузионные осложнения или болезни новорождённых, но также при этом играет роль уровень гемоглобина.
• Даффи. Два антигена, три группы, пренебрежение которыми может вызвать осложнения в редких случаях.
• MNSs. Девять групп на основе активных антигенов с зафиксированными случаями осложнений из-за выработки антител к ним.
• Лангерайс и Джуниор. Одна из новых систем, открытая в 2012 году в результате сотрудничества американских, японских и французских учёных. Согласно ей, существуют две дополнительные группы, определяемые транспортными белками, участвующими в переносе метаболитов и ионов.
• Велл-отрицательная группа. Была обнаружена ещё в середине XX века, когда против неизвестной молекулы в организме пациента выработались антитела, из-за которых был отторгнут донорский материал. Вещество удалось идентифицировать лишь в 2013 году, оно есть в крови 0,04% всех людей.
• Бомбей. Группа выделена на основании присутствующего в крови гена, из-за которого на эритроцитах не образуются антигены А и В. В итоге обладатель такого феномена может выступать в роли универсального донора, но ему можно перелить только такую же уникальную группу, а значит он должен создавать собственный банк крови. Возникновение уникального гена фиксируется у 0,0004% всего населения Земли, но в Индии этот показатель вырастает до 0,01%. Считается, что это связано с практикуемыми там близкородственными браками.

Переливания на основании совместимости

Знания о совместимости крови необходимы для успешного проведения гемотрансфузии. Для начала нужно определить её тип у пациента, поэтому каждому очень важно знать свою группу крови. Некоторые люди заносят эти сведения в гражданский паспорт, у военных распространённой практикой является указание данных в специальных документах и нашивках на одежду.

При непосредственном переливании в первую очередь основываются на показателях систем АВ0 и резус. В безвыходной ситуации до 500 мл резус-отрицательной I группы допустимо перелить любому взрослому человеку. В условиях катастрофической нехватки донорской крови во время Второй мировой войны использовали и большие количества, но вероятность несовместимости при этом была достаточно высока. Аналогичная ситуация наблюдается с донорством плазмы группы IV. Что касается пациента с этим типом крови, то ему можно перелить резус-отрицательную эритроцитарную массу групп II или III.

В настоящее время случаи переливания цельной крови встречаются только при объёмных её потерях. Они достаточно редки, и по возможности при этом используются одноимённые группы. В остальных случаях применяются отдельные компоненты, но и для них есть определённые правила. Так, в совместимости эритроцитарной массы прослеживается следующая закономерность:

• с I можно использовать эритроциты из такого же типа крови;
• со II — из I и II;
• с III — из I и III;
• с IV из любой.

Но при этом нужно обращать внимание на резус. Если он отрицательный, то и в донорской крови должен быть таким же. Если положительный, то это не имеет значения. Для плазмы правила немного другие:

• пациенту с I группой можно переливать компонент любой крови;
• со II — II и IV;
• с III — III и IV;
• с IV — только с IV.

Что касается других классификаций, то при переливаниях ориентируются также на систему Келл. При разнице в группах не может быть перелита цельная кровь, а только её компоненты.

Таким образом, классификаций и особенностей у разных групп крови достаточно много. В первую очередь во всех тонкостях и нюансах совместимости должны разбираться медицинские работники. Но и не связанные с этой сферой люди должны знать свой тип крови и понимать, какие группы могут спасти ему жизнь в экстренных ситуациях.

Гематологи выделяют наиболее важные Аг системы: кроме АВ0 и Rh+, это MNSs, P, Лютеран (Lu), Келл-Келлано (KК), Льюис (Le), Даффи (Fy) и Кид (Jk). Эти системы Аг учитываются в судебной медицине для отрицания и установления отцовства и иногда – при трансплантации органов и тканей.

Остановимся на некоторых из них.

Система MNSs.

По антигенам MNSs все люди делятся на группы: MS, NS, MNS, Ms, Ns, MNs. Как и система резус, эти агглютиногены в условиях нормы не имеют одноименных агглютининов и при переливании крови не учитываются, так как обладают слабой Аг. В то же время эти Аг учитываются при пересадке тканей и органов. Кроме того, наличие определенных Аг этой системы дает право судебным медикам решать вопрос об отрицании (но ни в коем случае не подтверждении) отцовства.

Система Келл

– антигены этой группы обозначаются буквами K и порядковым номером (от 1 до 22). Существуют 3 основных варианта сочетаний агглютиногенов этой системы: К₁ – группа Келл, К₂ – группа Келлано и К₁К₂ – группа Келл-Келлано. Фактор Келл встречается сравнительно редко – в 4-12% (среднероссийский показатель для фактора Келл равен 8,06%), а Келлано очень часто – в 98-99%. Вот почему более 90% людей имеют группу Келлано, около 8-10% – группу Келл-Келлано и очень небольшой процент людей (менее 1%) имеет группу Келл.

Остальные агглютиногены этой системы встречаются очень редко и практического значения не имеют.

Среди коренного населения Австралии, некоторых индейских популяций, эскимосов и монголоидов антиген К вообще не обнаружен.

Для переливания крови система Келл-Келлано значения не имеет, хотя описаны единичные случаи гемотрансфузионных осложнений при переливании несколько раз человеку группы Келл крови Келлано или Келл-Келлано. На этой же почве может быть конфликт между матерью и плодом.

Система Лютеран

включает комплекс антигенов, благодаря чему формируются различные фенотипы – Lu(a+), Lu(b+), Lu(a+b+), Lu(a+b-), Lu(a-b+), Lu(a-b-) и другие. Частота встречаемости исключительно распространенного антигена Lu b , т.е. фенотипов Lu(a+b+) и Lu(a-b+), cреди европеидной расы составляет приблизительно около 99,9%. Изредка к этим Аг встречаются Ат, что при Lu-несовместимой беременности приводит к легкой гемолитической болезни новорожденных.

Система Р

включает антигены Р, Р₁, и Р к , благодаря чему выделяются следующие фенотипы: Р₁ (в эритроцитах находятся антигены Р₁ и Р), Р₂ (антиген Р), Р₁ к (антигены Р₁ и Р к ), Р₂ к (антиген Р к ) и р (в эритроцитах Аг нет). Частота встречаемости Аг системы Р среди людей европеидной расы колеблется в пределах 75-80%, в негроидных популяциях она значительно выше, а среди монголоидов – ниже. Для переливания крови или её компонентов значения не имеет.

Значительный интерес представляет система антигенов Вел (Vel), так как число Vel-отрицательных людей составляет менее 0,04%, остальные люди, по крайней мере, среди европейцев, являются Vel-положительными. При переливании Вел-положительной крови Вел-отрицательному человеку могут образовываться Ат (анти-Vel). В связи со сказанным, если Vel-отрицательному человеку предстоит серьезная плановая операция, или женщина, отрицательная по Vel-антигену, беременна, то у таких людей берется заранее собственная кровь, которая в дальнейшем в случае необходимости может быть использована для переливания.

Мы не останавливаемся на других групповых признаках крови, хотя их определение может играть важную роль в клинике и судебно-медицинской экспертизе.

Согласно современным представлениям, мембрана эритроцита рассматривается как набор самых различных Аг, которых насчитывается более 500. Только из этих Аг можно составить более 400 миллионов комбинаций, или групповых признаков крови. Если же учитывать и все остальные Аг, встречающиеся в крови, то число комбинаций достигнет 700 миллиардов, т.е. значительно больше, чем людей на земном шаре. Разумеется, далеко не все Аг важны для клинической практики. И все же этот факт не должен недоучитываться врачами-клиницистами, ибо при переливании крови из-за несовместимости по сравнительно редко встречающимся Аг неожиданно могут возникнуть тяжелейшие гемотрансфузионные осложнения и даже смерть больного.

Нередко при беременности возникают серьезные осложнения, в том числе выраженная анемия, что может быть объяснено несовместимостью групп крови по системам мало изученных Аг матери и плода. При этом страдает не только беременная женщина, но в неблагополучных условиях находится и будущий ребенок. Более того, несовместимость матери и плода по группам крови может быть причиной выкидышей и преждевременных родов.

В настоящее время переливание цельной крови производится редко и только в тех случаях, когда помощь необходимо оказать экстренно, а под рукой нет компонентов крови. Грамотные клиницисты пользуются трансфузией различных компонентов крови, т.е. переливают то, что больше всего требуется организму: плазму, эритроцитарную, лейкоцитарную или тромбоцитарную массу. Даже при массивной кровопотере рекомендуется вливать плазму и, в крайнем случае, дополнительно эритроцитарную массу (не более 1/5 от количества введенной плазмы). В подобных ситуациях вводится меньшее количество Аг, что снижает риск посттрансфузионных осложнений.