Дтк анализ крови что это

В тесте используются сыворотка больного, неинфекционные аллергены в тех же концентрациях, как в предыдущих тестах, и взвесь тучных клеток перитонеальной жидкости крыс.

Реактивы и оборудование те же, что и при прямом базофильном тесте.

Перитонеальные тучные клетки крысы получают следующим образом: под глубоким эфирным наркозом крысе внутрибрюшинно вводят 20 мл подогретого до 37° С 0,9% раствора хлористого натрия, производят легкий массаж передней стенки живота в течение 1,5 минуты, а затем по его средней линии делают ножницами послойный разрез длиной 1 — 1,5 см. Осторожно переворачивают крысу брюшком вниз и по свисающей из отверстия петле кишечника перитонеальная жидкость стекает в пробирку, смоченную гепарином. Собранную жидкость центрифугируют при 1500 об/мин в течение 5—8 минут. Прозрачная надосадочная жидкость сливается, оставшаяся на дне пробирки взвесь тучных клеток используется в эксперименте.

Техника. На предварительно обезжиренное и окрашенное 0,3% раствором «нейтрального красного» предметное стекло наносится по 0,05 мл три компонента — исследуемая сыворотка, взвесь перитонеальных тучных клеток крысы и испытуемый аллерген, перемешивают и покрывают покровным стеклом, края которого смазаны вазелином. Параллельно готовятся контрольные препараты: 1-й —0,05 мл взвеси тучных клеток + 0,05 аллергена; 2-й — 0,05 мл взвеси тучных клеток + 0,05 мл сыворотки больного. Препараты— опытный и контрольные — ставят на 15 минут в термостат при 37°С, затем под иммерсионной системой микроскопа подсчитывают по 40 тучных клеток в каждом препарате и отмечают среди них количество дегранулированных клеток. Деструкция тучных клеток проявляется «разбуханием» клеток, появлением по периферии вакуолей, «опустошением» клеток от гранул, выходом последних за пределы клетки. Оценка реакции проводится по тем же признакам, что и предыдущие.

Анализ крови на аллергены — процедура, позволяющая людям, страдающим аллергией, выявить среди перечня веществ то, что вызывает реакцию. Существует несколько методик диагностики аллергической реакции.

Когда назначаются анализы крови на аллергию?

Аллергены и их основные виды

Роль иммуноглобулина в аллергической реакции

Виды анализов крови на аллергены

Анализ методом ДТК

Как подготовиться к сдаче крови?

Процедура забора крови

Расшифровка показателей: нормы и отклонения у взрослых и детей

Классы аллергии по анализу крови

Где сдать анализы?

Комментарии и Отзывы

Когда назначаются анализы крови на аллергию?

Анализ сдают из-за следующих причин:

• симптомы аллергии возникают сезонно, после употребления определенной пищи, контакта с конкретным веществом;
• безуспешная медикаментозная терапия хронического бронхита, экземы, дерматита, глазных болезней, нейродермита;
• подозрение на генетическую склонность к аллергии;
• синдром раздраженной кишки;
• подозрение на псориаз;
• ожирение;
• беспричинные прыщи и угри;
• кашель, одышка, ринит у производственных рабочих;
• невозможность выявить другими способами причину аллергической реакции;
• дискомфорт при проведении кожных аллергопроб;
• для диагностики уровня ответа организма на лечение аллергии.

Аллергены и их основные виды

Существует несколько видов аллергенов:

1. Эпидермальные. Такую аллергию провоцируют домашние любимцы: кошки, собаки, рыбы, птицы.
2. Бытовые. К бытовым аллергенам причисляется пыль, которая образуется из частичек одежды, постельного белья и прочих вещей, находящихся дома.
3. Лекарственные. Все лекарственные препараты имеют противопоказания. Часто к ним относится индивидуальная непереносимость тех или иных компонентов. При употреблении одних лекарств может начаться перекрестная реакция на другие. Подобный ответ встречается на все антибиотические препараты группы пенициллинов.
4. Пищевые. Аллергия на пищевые продукты является самой распространенной. Чаще всего появляется реакция на бобы, цитрусовые, рыбу, молочные продукты. Аллергия может возникнуть на добавки: красители, консерванты.
5. Пыльцевые. У некоторых людей имеется аллергия на пыльцу. Если растения имеют схожую структуру, у пациента аллергика развивается перекрестная реакция.
6. Промышленные. У некоторых может развиться индивидуальная аллергическая реакция, например, на ткани, краски, лаки.
7. Инфекционные. Некоторые инфекционные агенты, всасываясь внутрь организма, выбрасывают токсины и другие продукты жизнедеятельности, которые вызывают аллергию. К ним относятся туберкулез, сифилис и другие.
8. Грибковые. Этот вид аллергена обитает в теплых и влажных местах: в ванной, на кухне. Грибковые аллергены могут спровоцировать бронхиальную астму.

Роль иммуноглобулина в аллергической реакции

Иммуноглобулин (Ig) – белок, который вырабатывает кровь для защиты от патогенных микроорганизмов, и чем выше его уровень, тем интенсивнее выражается аллергия.

Виды иммуноглобулина

В организме существует пять типов иммуноглобулина, и каждый из них выполняет свои функции.

Виды иммуноглобулина и их особенности приведены в таблице:

Обозначение	Характеристики
M	Является главным защитником от антигенов. Организм вырабатывает его как только антиген попадает внутрь.
G	Начинает вырабатываться после IgМ, понижая возможность ремиссии.
E	Этот класс Ig принимает активное участие во время реакции, защищая организм от аллергенов. При отсутствии аллергенов, этот белок почти полностью исчезает.
A	Активирует защиту слизистой оболочки против раздражителей и вредных бактерий.
D	Занимает в крови до одного процента и не до конца изучен.

Исследуя сыворотку крови, аллергологи обращают внимание на содержание иммуноглобулинов класса Е, так как именно они отвечают за аллергию.

Виды анализов крови на аллергены

• общий (клинический) анализ крови;
• иммуноферментный (ИФА);
• молекулярный;
• прайм тест;
• методика ДТК.

Общий

Чтобы выяснить, защищает ли иммуноглобулин организм, пациенту назначается общий анализ крови (ОАК). Он показывает концентрацию иммуноглобулина Е в целом. Диагностика совершается для того, чтобы использовать данные в качестве отдельного показателя для расшифровки результатов.

Иммуноферментный

ИФА (иммуноферментный анализ) заключается в том, чтобы исследовать сыворотку крови на количество специфических иммуноглобулинов.

• анализ дает точные и конкретные результаты;
• выявляет иммуноглобулин к конкретному виду аллергена.

Молекулярный

Особенности молекулярного анализа крови на аллергены:

• методика основана на исследовании состава потенциальных аллергенов на молекулярном уровне;
• способен выявлять ту конкретную составляющую, на которую у пациента возникает аллергическая реакция;
• диагноз на основе молекулярного анализа остается дифференциальным;
• анализ определяет перекрестные аллергические компоненты, к которым особенно чувствителен больной.

Прайм-тест

1. Методика выявляет скрытую пищевую непереносимость. Дополнительно определяет опасные для здоровья продукты питания.
2. Диагностика происходит благодаря индивидуальной реакции кровяных телец на компоненты пищи. Взаимодействуя с «вредной» пищей начинают погибать клетки иммунной системы (лимфоциты).

Опираясь на результат, иммунолог составит индивидуальный график лечения. От степени непереносимости зависит время, на которое придется отказаться от аллергенного продукта.

Анализ методом ДТК

ДТК – специальная методика, позволяющая скорректировать лечебную диету и исключить аллергены.

Суть диагностики заключается в таких процессах:

• в составе иммунной системы находятся тучные клетки, которые играют значительную роль в развитии аллергии;
• когда внутрь организма попадают вредоносные вещества, тучные клетки активируются для защиты.

Подробно о том, какие есть анализы на аллергию узнаем из видео от автора Надежда Ильинцева.

Как подготовиться к сдаче крови?

Делать забор крови рекомендуется в период ремиссии, когда нет серьезного аллергического обострения.

Таким образом, при искусственном введении аллергенов, ответ иммунной системы будет максимально точным, и врач сможет определить вид аллергии.

Особенности подготовки к исследованию:

1. Перед сдачей биологического образца необходимо по возможности отказаться от медикаментов, даже если лечение относится к подавлению аллергических симптомов. Этот момент важно согласовать с врачом.
2. За несколько дней до проведения исследования нужно скорректировать диету. Исключить все продукты-аллергены: цитрусовые, орехи, морепродукты, молочные продукты, шоколад, мед. Рекомендуется на время отказаться от экзотических фруктов, а также убрать из рациона продукты, в состав которых входят химические добавки.
3. За несколько дней до анализов необходимо снизить до минимума контакт с домашними любимцами.
4. За три дня до проведения исследования, пациенту рекомендуется избегать тяжелых физических нагрузок и стрессовых ситуаций.
5. Сдавать кровь нужно натощак. Последний прием пищи приходится за 8-10 часов до забора.

Процедура забора крови

Забор осуществляется стандартным методом — из вены, расположенной на сгибе локтя.

Расшифровка показателей: нормы и отклонения у взрослых и детей

Пациентам не рекомендуется расшифровывать показатели анализов самостоятельно. Лучше предоставить это занятие аллергологу, который после исследования разработает грамотную схему лечения.

В диагностике лекарственной аллергии выделяют следующие основные моменты:

• сбор аллергологического анамнеза;
• методы диагностики лекарственной аллергии in vitro (лабораторная диагностика);
• методы диагностики лекарственной аллергии in vivo (провокационные тесты на больном).

Сбор аллергологического анамнеза является важным этапом в диагностике лекарственной аллергии. Необходимо уточнить:

1. страдает ли сам больной или его родственники какими-либо аллергическими заболеваниями;
2. есть ли профессиональный контакт с медикаментами;
3. были ли прежде аллергические реакции на лекарственные препараты, через какой интервал времени после приема они развивались (быстрые/замедленные). Необходимо выяснить характер этих реакций конкретно на каждый препарат (укладываются ли они в представления об аллергических реакциях или относятся к другим нежелательным реакциям);
4. возникали ли аллергические реакции от применения наружных средств (лечебных мазей, кремов и других форм), которые могут быть обусловлены как лекарствами, входящими в их состав, так и мазевой основой или консервантами, красителями;
5. как пациент переносил вакцинацию и введение лечебных сывороток, препаратов крови;
6. отмечается ли повышенная чувствительность к бытовым, пыльцевым, пищевым, эпидермальным аллергенам, косметическим средствам и др.;
7. менялись ли аллергические проявления с течением времени (локальные проявления или трансформация в полисистемную реакцию).

Лабораторные методы диагностики лекарственной аллергии (in vitro)

Необходимо сразу отметить, что даже с позиций сегодняшнего дня ни лабораторная диагностика, ни кожное тестирование не дает 100% гарантии отсутствия или наличия лекарственной аллергии при применении конкретного препарата. Это объясняется тем, что в большинстве случаев лекарственная аллергия развивается не на исходный медикамент, а на продукты его метаболизма, механизмы формирования аллергических реакций также разнообразны и не подтверждаются неким одним универсальным методом. Наконец, в ряде случаев в формировании нежелательной реакции, внешне похожей на аллергическую, вовсе нет иммунных механизмов (псевдоаллергия). Поэтому отрицательный результат проводимого обследования может свидетельствовать только о низком риске развития аллергии при использовании данного лекарственного препарата.

Общим показанием для лабораторной диагностики является необходимость назначения лекарственного средства при:

• наличии в анамнезе аллергических заболеваний;
• тяжелых проявлениях лекарственной аллергии (шок и т. д.) в анамнезе;
• подозрении на профессиональную лекарственную аллергию;
• непереносимости лекарств и исключения аллергической реакции на медикамент;
• обширных поражениях кожи и невозможности выполнить кожные пробы;
• необходимости обследования на фоне приема антигистаминных препаратов и высоких доз глюкокортикостероидов (ГКС).

Лабораторные методы диагностики направлены на выявление:

• специфических IgE;
• сенсибилизированных Т-лимфоцитов.

Ранее в диагностике лекарственной аллергии II и III типов важная роль отводилась выявлению специфических IgG и IgM, однако проведенные в последние годы исследования показали их низкую ценность, поскольку они выявляются у каждого принимавшего лекарственный препарат и являются результатом иммунного ответа организма, а не критерием диагностики лекарственной аллергии.

Кроме того, с позиций сегодняшнего дня достоверность старых иммунологических методик (реакция дегрануляции тучных клеток, РПГА и др.) в аллергологии подвергается большому сомнению, поскольку множество внешних и внутренних факторов способны оказать влияние на конечный результат исследования.

В лабораторной диагностике реакций I типа (IgE-зависимых) используют:

1. определение специфических IgE к определенным медикаментам методом иммуноферментного анализа (ИФА) или радиоаллергенсорбентного теста (РАСТ) с использованием специальных наборов для диагностики лекарственной аллергии «Аллергодиски»;
2. определение медиаторов аллергического воспаления (гистамина, триптазы, лейкотриенов) в периферической крови, назальных и бронхиальных секретах и моче. Необходимо отметить, что уровень гистамина в сыворотке крови повышен только в течение первого часа после острой аллергической реакции, а затем он приходит к норме. Повышение уровня триптазы в крови не всегда специфично и выражено через 1 и 6 часов от начала аллергии;
3. методику CASTs (с целью диагностики лекарственной аллергии), в которой с помощью проточного цитофлюоресциметра определяются активированные базофилы, несущие специфические антигены CD64+ и CD203. К сожалению, из-за высокой стоимости данный метод широко не используется в нашей практике;
4. реакцию дегрануляции тучных клеток (РДТК). Используют сыворотку крови больных (содержащую IgЕ), тучные клетки крыс и исследуемые лекарственные аллергены. Если в исследуемой сыворотке есть специфические IgЕ против лекарственного агента, они связываются с аллергеном на поверхности тучной клетки, вызывая ее дегрануляцию. Реакцию оценивают микроскопически по изменению морфологии тучных клеток. Число дегранулировавших клеток сравнивают с контрольными образцами (в которых сыворотку больного смешивают с тучными клетками без добавления аллергенов). Реакция считается положительной, если разница дегранулировавших клеток в опытном и контрольном образцах составляет более 20%;
5. реакцию торможения миграции лейкоцитов (РТМЛ). РТМЛ in vivo является одновременно лабораторным (подсчет числа лейкоцитов в смывах из полости рта до и после контакта с аллергеном) и провокационным тестом (возможно появление микросимптомов аллергии). Реакция расценивается как положительная, если число лейкоцитов в смывах через 15-30 минут после контакта с аллергеном снижается в 2 или более раза.

Определение специфических IgE свидетельствует о возможности развития лекарственной аллергии I типа с тяжелыми последствиями. Достоверность результатов реакции дегрануляции тучных клеток и реакции торможения миграции лейкоцитов не превышает 60%, однако доступность и дешевизна не позволяют в наших условиях полностью отказаться от их использования.

В лабораторной диагностике реакций II типа (IgE-независимые):

1. определяют титр комплемента по 50% гемолизу эритроцитов (реакция диагностически значима при исследовании на пике клинических проявлений). В ходе цитотоксической реакции белки комплемента расходуются, титр комплемента снижается. В случае аллергической цитопении отмечаются изменения в анализе периферической крови;
2. реакция спецгемолиза также может помочь в выявлении виновника аллергической реакции цитотоксического типа, однако для этой методики характерна низкая специфичность.

В лабораторной диагностике реакций III типа (IgE-независимые) применяется:

1. выявление циркулирующих иммунных комплексов (существуют методики исследования состава иммунных комплексов, а также гистохимического выявления отложений иммунных комплексов в тканях после биопсии);
2. косвенным признаком иммунокомплексной реакции является снижение титра комплемента (он активируется и расходуется в ходе реакции III типа).

Диагностика лекарственной аллергии IV типа (IgE-независимые) состоит в:

• определении наличия сенсибилизированных лимфоцитов (реакция бласттрансформации лимфоцитов в присутствии тех или иных аллергенов с морфологическим учетом бластов), данный метод — один из немногих, который сегодня широко используется в развитых странах;
• исследовании продукции цитокинов лимфоцитами после контакта с вероятным аллергеном в реакции торможения миграции лейкоцитов.

________________
Вы читаете тему:
Современные представления о лекарственной аллергии (Артишевский С. Н., Барановская Т. В., Борушко А. И. Белорусская медицинская академия последипломного образования. «Медицинская панорама» № 9, октябрь 2009)