ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК
Понятие резус-фактор — слишком общее (и устаревшее). Система резус антигенов многообразна. Современные методы исследования позволяют делать тесты индивидуально по резусу D, С, с, Е, е. Кроме этого, необходимо выявлять случаи со слабым D-антигеном или вариабильным D-антигеном. Вся эта информация тоже крайне важна при подборе донора в случае необходимости.
Ход работы. Определение резус-принадлежности крови проводится с помощью стандартной универсальной сыворотки «антирезус» для всех групп крови. В пробирку вводят одну каплю (0,05 мл) исследуемой крови или эритроцитов и добавляют 1—2 капли стандартного универсального реагента «антирезус» той же группы крови. Перешивают содержимое путем встряхивания пробирки и помещают ее на водяную баню на 5 минут при температуре 370С, так как иммунная реакция с антигеном требует оптимальной температуры. Как правило, агглютинация наступает в течение 3-5 мин. По истечении этого времени для исключения неспецифической агрегации эритроцитов в пробирку добавляют 2—3 мл изотонического раствора хлорида натрия и перемешивают (но взбалтывая!), 2—3 раза переворачивая пробирку.
В некоторых случаях не представляется возможным определение резус-принадлежности реципиента, тогда пользуются индивидуальной пробой на резус-совместимость крови донора и реципиента.
На чашку Петри наносят 2 капли сыворотки крови больного и маленькую каплю переливаемой крови, их смешивают и ставят на водяную баню (42-45 °С) на 10 мин. Если наступила агглютинация, то кровь донора несовместима с кровью реципиента и ее переливать нельзя.
Трактовка результатов. Пробирки просматривают на свет невооруженным глазом. При положительном результате агглютинация выражается в появлении хлопьев из склеенных эритроцитов на фоне просветленной жидкости. При отрицательном результате жидкость в пробирке остается равномерно окрашенной, без признаков агглютинации эритроцитов. Результат учитывают как истинный после проверки контрольных, образцов, т. е. при положительном результате со стандартными резус-отрицательными эритроцитами, одногруппными с исследуемой кровью.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС ПРИНАДЛЕЖНОСТИ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ ЦОЛИКЛОНОВ
Цоликлоны изготавливаются из асцитной жидкости мышей – носителей анти-D и анти-С гибридом. Цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с предназначены для определения резус принадлежности крови.
Ход определения. На планшет индивидуальными пипетками наносятся цоликлоны Анти-D, Анти-С, Анти-с по одной большой капле (0,1мл). Рядом с каплями антител наносится по одной маленькой капле исследуемой крови (0,01 мл). Кровь смешивается с реагентом. Наблюдается ход реакции с цоликлонами визуально при легком покачивании планшета в течение трех минут. Агглютинация эритроцитов с цоликлонами обычно наступает в первые 3-5 сек., но наблюдение следует вести 3 минуты ввиду более позднего появления агглютинации с эритроцитами, содержащими слабые разновидности резус-антигена. При использовании цоликлонов термостатировать не требуется,
Интерпретация результатов. Результат реакции в каждой капле может быть положительным или отрицательным. Положительный результат выражается в агглютинации (склеивании) эритроцитов. Агглютинаты видны невооруженным глазом в виде мелких красных агрегатов, быстро сливающихся в крупные хлопья. При отрицательной реакции капля остается равномерно окрашенной в красный цвет, агглютинаты в ней не обнаруживаются.
Наличие агглютинации с Анти-D, Анти-С или Анти-с цоликлонами свидетельствует о том, что кровь резус-положительная, а отсутствие агглютинации – что кровь резус-отрицательная.
При выполнении множества медицинских действий медикам необходимо знать резус-фактор человеческой крови, который передается генетическим путем. Чтобы избежать резус-конфликта, информация о таком свойстве нужна и при ведении беременных. Для установления этого свойства используется несколько методов диагностики.
Резус-фактор — что это такое?
Резус-фактор – это антиген, который находиться на поверхности красных кровяных телец (эритроцитов)
Один из основных параметров, который определяется в крови, — резус-фактор. Такая характеристика передается от родителей и не способна меняться в течении жизни.
Резус-фактором называется белок, который находится на верхней части эритроцитов. Его наличие, а также отсутствие считается индивидуальным явлением. Резус-фактор, при котором присутствует антиген D, является положительным. В расшифровке анализа он обозначается так: Rh+. Резус, который не имеет антигена, в расшифровке обозначают Rh-.
За статистикой 85% людей имеют положительный резус, а остальные – отрицательный.
Определяется такой параметр во время установления группы крови. Информация о резус-факторе пациента необходима медицинским работникам в следующих случаях:
- подготовка к операции
- в период беременности
- для переливания крови
- пересадка органов
- гемолиз
- анемия
- сепсис
Для определения этой характеристики крови применяется несколько диагностических способов.
Виды методов исследования, проведение процедуры
Резус-фактор может быть положительным либо отрицательным
Анализ на установления резус-фактора проводят в лабораторных или стационарных условиях больницы. Для этого сдают венозную кровь или кровь из пальца.
Узнать резус-фактор можно с помощью следующих методов:
- Цоликлоновый способ. Для этого способа используют специальные моноклональные реагенты. Их помещают на специальный планшет, возле него наносят кровь. После перемешивания в трехминутный период планшет переворачивают из стороны в сторону. При появлении осадков или хлопьев расшифровывается положительный результат. Отрицательный резус будет, когда изменения отсутствуют.
- Экспресс-метод. Такой метод применяется чаще всего. Исследование выполняют в пробирках, используя сыворотку АВО, которая является для всех групп универсальной. В каплю такого материала прибавляют столько же эритроцитов, после чего покачивают пробирку три минуты. Раствор хлорида натрия вливают в этот состав, несколько раз пробирку следует перевернуть и с помощью отраженного света определяют агглютинацию.
- Способ конглютинации на чашках Петри. Помещают в чашку Петри несколько капель сыворотки антирезусной по левую и правую сторону разносерийные. В этот материал добавляют контрольные резус-отрицательные и резус-положительные, а также исследуемые эритроциты. После того, как перемешали, чашку располагают на водяной бане на протяжении десяти минут. Затем при свете внимательно рассматривают. Если агглютинация присутствует, то этот факт свидетельствует о положительном резусе, если отсутствует – результат отрицательный.
- С использованием желатина. Этот метод заключается в добавлении в кровь желатинового раствора, в его подогревании в течении десяти минут, добавления хлорида натрия (изотонический раствор). После этих действий содержимое в пробирке перемешивают.
Совместимость групп крови
Резус-фактор крови определяется при исследовании одновременно с установлением ее группы. При каждой группе крови возможно наличие или отсутствие антигена.
В медицине существует такое понятие, как совместимость группы. При этом устанавливается возможность зачатия, ведь в этом случае также возможен конфликт.
Специалисты определяют следующие варианты совместимости при зачатии:
- Первая группа у мужского пола совмещается со всеми группами женского пола.
- Совместимы четвертая, а также вторая группа у женщин со второй у мужчины.
- Конфликт возможен при второй группе у отца, но первой и третий у матери.
- Конфликтными являются первая и вторая у женского пола, и третья у мужчины.
- Совместимыми считаются третья группа крови у мужчины и третья, а также четвертая у женщины.
- Если у обоих супругов четвертая группа – совместимость.
- При четвертой группе у мужского пола и всех остальных групп у женщин наблюдается конфликт.
Подробнее о группах крови и резус-факторе можно узнать из видео:
P.S. Только вот я сама из города и у нас его в продаже не нашла, заказывала через интернет.
P.S. Я тоже из города ))